傅經(jīng)理
產(chǎn)品品牌:ZCIBIO(茁彩生物)
產(chǎn)品名稱:大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒
英文名稱:Rat BDNFELISA kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
實(shí)驗(yàn)樣本:血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本
大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域:僅供科研實(shí)驗(yàn)使用,不得用于臨床診斷
我的標(biāo)準(zhǔn)曲線是平的或者是非線性的,這可能是由于什么原因引起的?
引起不理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線的原因有很多,常見的原因例舉如下:
◆ 確定稀釋是否得當(dāng)。
◆ 確定波長是否正確。
◆ 標(biāo)準(zhǔn)品和樣品必需在15-20分鐘內(nèi)滴加入板內(nèi)。(除非試劑盒內(nèi)說明書特別說明)
◆ 檢查背景是否過高。
◆ 確定酶標(biāo)板是否正確洗滌。 不恰當(dāng)?shù)南礈炜赡軙鹁哂懈弑尘暗钠街鼻€。
◆ 在測定過程中重復(fù)讀板。在超過建議時(shí)間后讀板會導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
◆ 如果高的標(biāo)準(zhǔn)品的讀數(shù)超過了酶標(biāo)儀的范圍,確定標(biāo)準(zhǔn)品是否正確溶解,孵育時(shí)間和溫度是否準(zhǔn)確。
◆ 為保證實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性請重復(fù)測定。
◆ 如果使用對照,對照的濃度必須在測定范圍內(nèi)。
◆ 在檢測和孵育過程中確定試劑沒有被污染。
◆ 沒有任何信號的平直標(biāo)準(zhǔn)曲線可能是由于酶結(jié)合物或者底物沒有反應(yīng)。 檢查各個(gè)操作過程
◆ 由于許多酶標(biāo)儀的限制,因此建議標(biāo)準(zhǔn)品檢測由高向低做復(fù)孔。
我是否可以更改底物處理的方法?
◆ 如果反應(yīng)物溶液需要混合,確保加入的反應(yīng)物試劑體積正確并充分混合。混合后的溶液必需在15分鐘內(nèi)使用(化學(xué)發(fā)光檢測多4小時(shí))。如果反應(yīng)物混合得太早,則在容器中的顏色可能會發(fā)生變化。
◆ 如果底物是凍干品或片劑,則根據(jù)說明書中的方法用適當(dāng)體積的稀釋液將其*溶解。混合*后并在說明書中推薦的時(shí)間內(nèi)使用。
我在移液的時(shí)候是否要按照一定的順序?
◆ 根據(jù)說明書中的順序進(jìn)行移液操作。
◆ 高靈敏度檢測利用了放大系統(tǒng)。在底物孵育完成之后,按照加底物的順序依次加入放大試劑。
◆ 底物加完之后,輕拍酶標(biāo)板使其充分混合。
底物有可能被污染嗎?
◆ 是的。如果測定時(shí)使用的是堿性磷酸酶或者辣根過氧化物酶標(biāo)記的結(jié)合物,在測定時(shí)要注意避免污染。污染可能會導(dǎo)致產(chǎn)生超過酶標(biāo)儀范圍的值。避免與金屬或氧化試劑接觸。使用新容器。
底物是否需要在黑暗環(huán)境中進(jìn)行孵育?
◆ 不需要。不過在孵育過程中應(yīng)避免陽光直射。
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