傅經(jīng)理
脂蛋白酯酶(LPL)&肝脂酶(HL)試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
脂蛋白酯酶(Lipoproteinlipase,LPL)是甘油三酯降解的降速酶,可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯,主要在肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞中合成,在脂質(zhì)代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)中發(fā)揮重要作用。脂蛋白酯酶水解 4-硝基苯棕櫚酸酯產(chǎn)生 4-硝基苯,在 400nm 有特征吸收峰。
脂蛋白酯酶(LPL)&肝脂酶(HL)試劑盒試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計(jì)、低溫臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、1mL 玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、EP 管、冰、丙酮和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提取:
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);10000g 4℃離心 10min, 取上清,置冰上待測(cè)。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入
1mL 試劑一),進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
二、測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 400nm,蒸餾水調(diào)零。
2、將 5µmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液用試劑一稀釋 16 倍至 0.3125 µmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。