傅經理
免疫熒光/IF - FJB染色價格:55元
免疫熒光/IF - FJB染色染色機制
FJB染色的原理是FJB染液是一種帶熒光的物質,可以與變性的神經元結合從而發綠色熒光,而正常神經元不會與FJB染液結合所以不發熒光。
應用
FJB可以與變性神經元結合發出綠色熒光,從而可以標記神經組織內的變性壞死神經元。可以借此研究不同處理方法對神經組織的損傷。
染液配制
純水配成5mg/ml的濃縮液,用時0.1%的冰醋酸做溶劑,1:50-1:100稀釋
染色方法
1、石蠟切片脫蠟至水。
2、用現配的0.1%冰醋酸做溶劑,按1:50-1:100配制FJB的工作液,混勻,滴加到組織上室溫孵育20min;
3、純水沖洗,DAPI染核,再用PBS沖洗;
4、吹風機吹干,二甲苯透明2min,加一滴中性樹脂封片,晾干。
染色結果
壞死神經元胞漿和胞核呈綠色熒光,正常神經元無著色。神經元著色有時候伴隨著腦梗,在梗死附近著色較明顯。
注意事項
1、FJB染色中用到的0.1%的冰醋酸要現配現用。
2、所有染色步驟完成后,切片要自然晾干或用吹風機低檔吹干,然后透明,樹膠封片,因為已結合的FJB可溶于甘油,酒精,所以不能直接用熒光封片劑封片,也不能在酒精中做脫水處理。
3、FJB與組織的結合可逆,因此做完后要盡快鏡檢拍照,避免熒光淬滅。