微生物量碳測定是評估微生物群落中碳含量的一種方法,這對于理解微生物在生態系統中的角色和功能至關重要。
微生物量碳的測定常采用K2CrO7氧化法檢測,實驗步驟:
分別吸取2ml 0.4 mol·L-1的K2CrO7溶液和15ml混合酸放入沸瓶,加入等量的玻璃球。吸取8-10ml浸提液,放入電爐上,安裝好冷凝系統,調壓至130伏開始加熱。從玻璃球沸騰時開始計時,保存沸騰30分鐘,期間應搖勻兩次。在30分鐘到前2分鐘關閉電爐,利用余熱繼續保存沸騰30分鐘,隨后從冷凝管上口加入20ml蒸餾水,清洗冷凝管壁,降低沸瓶溫度。 取下沸瓶,待冷卻至室溫,加入2-3滴指示劑,用準確標定過的(NH4)2Fe(SO4)2溶液進行滴定。顏色從黃色à深綠色à天藍色à淡灰色à紅棕色à終點。同時用0.5 mol•L-1 K2SO4代替浸提液做空白,注意兩個電爐之間的差異。 注:(NH4)2Fe(SO4)2溶液的標定:在三角瓶中放入0.1 mol·L-1K2CrO7標準溶液10ml,加入混合酸15ml,搖勻冷卻,用(NH4)2Fe(SO4)2溶液滴定,顏色反應同上。一般在測定開始和結束時各標定一次,取平均值。 結果計算: C(ug/ml)=[(V空白-V樣本)*N(NH4)2Fe(SO4)2*3*1000]/吸取樣品的體積數(ml) C(ug/g)=[C(ug/ml)*浸提液的總體積數(ml)]/W干土(g) EC(ug/g)=C熏蒸(ug/g)-C未熏蒸(ug/g) 微生物量碳BC(ug/g)=EC/0.38(ug/g)
注意事項:
實驗過程中要確保所有玻璃器皿干凈無污染。
加熱和滴定過程中要嚴格控制時間和溫度。
滴定終點要準確判斷,避免誤差。
空白實驗和標定實驗是確保結果準確性的關鍵步驟,不可忽視。
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