糞便彈性蛋白酶-1(fecal elastase-1，F(xiàn)E-1)由胰腺腺泡細(xì)胞分泌，具有高度穩(wěn)定性，在腸道中幾乎不被分解，室溫下能保持穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)1周，且取樣方便易行，檢測(cè)過(guò)程不受外源性Pancreatin制劑的影響。
 

　　定義與功能
 

　　定義：糞彈力蛋白酶(FE-1)是一種通過(guò)腸道排泄的彈力蛋白酶，它能夠抵抗細(xì)菌蛋白酶的水解，并在室溫下保持穩(wěn)定。
 

　　功能：作為胰腺外分泌功能的指標(biāo)，F(xiàn)E-1的測(cè)定對(duì)于診斷胰腺外分泌功能不全具有重要意義。
 

　　檢測(cè)方法
 

　　主要方法：酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。通過(guò)收集受試者的少量糞便樣本，利用ELISA技術(shù)測(cè)定FE-1的含量。
 

　　檢測(cè)原理：
 

　　ELISA檢測(cè)基于抗原與抗體之間的特異性結(jié)合原理。在檢測(cè)過(guò)程中，首先將FE-1抗體包被在微孔板表面，然后加入待測(cè)的糞便樣本。如果樣本中存在FE-1，則會(huì)與抗體結(jié)合形成抗原-抗體復(fù)合物。接著，加入酶標(biāo)記的二次抗體，該抗體會(huì)與抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物。最后，加入酶底物，酶會(huì)催化底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)，顏色的深淺與樣本中FE-1的含量成正比。通過(guò)測(cè)量顏色反應(yīng)的強(qiáng)度，可以定量測(cè)定糞便中FE-1的含量。
 

　　檢測(cè)步驟
 

　　ELISA檢測(cè)FE-1的步驟通常包括以下幾個(gè)方面：
 

　　試劑準(zhǔn)備：將ELISA試劑盒中的各組分(如包被抗體、酶標(biāo)抗體、底物等)按照說(shuō)明書進(jìn)行準(zhǔn)備。
 

　　樣本處理：收集受試者的糞便樣本，并按照說(shuō)明書進(jìn)行適當(dāng)處理(如稀釋、離心等)。
 

　　加樣：將處理后的樣本加入已包被FE-1抗體的微孔板中。
 

　　孵育：將微孔板在適當(dāng)?shù)臏囟认逻M(jìn)行孵育，使樣本中的FE-1與抗體充分結(jié)合。
 

　　洗滌：去除未結(jié)合的成分，保留抗原-抗體復(fù)合物。
 

　　加酶標(biāo)抗體：向微孔板中加入酶標(biāo)二次抗體，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物。
 

　　再次孵育和洗滌：重復(fù)孵育和洗滌步驟，確保形成穩(wěn)定的復(fù)合物。
 

　　加底物顯色：加入酶底物，酶催化底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)。
 

　　終止反應(yīng)和讀數(shù)：加入終止液終止反應(yīng)，并使用酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)下測(cè)量各孔的吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中FE-1的含量。
 

　　臨床應(yīng)用
 

　　FE-1 ELISA檢測(cè)在臨床中主要用于評(píng)估胰腺外分泌功能。當(dāng)胰腺外分泌功能受損時(shí)，糞便中FE-1的含量會(huì)相應(yīng)降低。因此，通過(guò)檢測(cè)糞便中FE-1的含量，可以間接反映胰腺外分泌功能的狀態(tài)。該方法在診斷胰腺外分泌功能不全、慢性胰腺炎等胰腺疾病中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。同時(shí)，由于該檢測(cè)方法簡(jiǎn)便易行、成本相對(duì)較低且不受Pancreatin替代療法的影響，因此在臨床上得到了廣泛應(yīng)用。