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固氮酶活性檢測—乙炔還原法

時間:2024-8-19閱讀:26
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生物固氮是自然生態系統利用氮素的主要途徑,固氮微生物利用體內固氮酶,通過生物固氮作用(自生固氮、共生固氮或聯合固氮的形式)將大氣中的分子氮(N2)轉化成氨(NH3),參與氮素循環。

01固氮酶的檢測原理

固氮酶一般指鉬鐵固氮酶,即鐵蛋白(nifH編碼)和鉬鐵蛋白(nifDK編碼)構成的雙組分蛋白酶;鐵蛋白負責傳遞電子給鉬鐵蛋白,N2和其他底物的結合還原在鉬鐵蛋白進行。

乙炔還原法的檢測原理是基于固氮酶的還原性,即指它可將與N2結構相似的乙炔(C2H2)還原為乙烯(C2H4)。由此,C2H2可以被用作N2的替代底物,通過測定C2H4生成量來推算出固氮酶活性。

02固氮酶的應用方向

固氮酶的應用范圍廣泛,在農業生產、生態保護、環境修復、科學研究和合成生物學等領域展現出巨大潛力。例如,固氮酶可以用于優化施肥管理;評估土壤固氮能力;篩選和鑒定高固氮能力的菌株;研究品種選育和菌株固氮改良潛力;評估環境污染修復狀況等。


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