不同的實驗中我們都會遇到封閉液,像常規的ELISA實驗中封閉液也是不可queshao的,那讓我們來看看哪些是ELISA實驗中常見的吧!
ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點,蔗糖封閉的原理:
ELISA實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用;
封閉液一般是BSA(牛血清白蛋白)、脫脂奶粉、酪蛋白、明膠等或者是Tween-20(0.05 - 0.1%)稀溶液PBST或者TBST等。
加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑"的作用。
蔗糖溶液一般在ELISA板子經過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數選擇前者。
除此外,封閉劑還可用5%的脫脂乳,0.4%的明膠,但是實驗表明前者比較好,后者不容易洗干凈未結合上的明膠。