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實驗動物（大鼠、小鼠、兔）腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞

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更新時間：2022-11-23 08:37:01瀏覽次數(shù)：232次

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產(chǎn)品簡介

組織來源：實驗動物的腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞器官來源：實驗動物的腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長狀態(tài)：貼壁生長免疫類型：培養(yǎng)品系：腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞用途范圍：科研實驗

詳細(xì)介紹

組織來源： 實驗動物的腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞

器官來源： 實驗動物的腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞

生長狀態(tài)： 貼壁生長

免疫類型： 培養(yǎng)

品系： 腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞

用途范圍： 科研實驗，不得用于臨床

保存條件： -60°C

純度： >1x106 細(xì)胞數(shù) %

物種來源： 上海中科院細(xì)胞庫

產(chǎn)地：上海

品牌： 科翰盛

規(guī)格： T25瓶或者1mL凍存管

細(xì)胞形態(tài)： 鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞

是否是腫瘤細(xì)胞：否

貨號： kw-9061

細(xì)胞介紹

該細(xì)胞系源自一只雌性英國可卡犬的腎臟組織,由S.H. Madin and N.B. Darby于1958年建立。該細(xì)胞為角蛋白陽性細(xì)胞。

細(xì)胞特性

1) 來源:實驗動物腎

2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長

3) 含量:>1x10⁶ 細(xì)胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5) 用途:僅供科研使用。

運輸和保存:干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理:

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備MEM 培養(yǎng)基; 胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二.細(xì)胞處理:

1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇::

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。