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細(xì)菌培養(yǎng)是指利用人工方法讓細(xì)菌快速生長繁殖的方 法。細(xì)菌在自然界中有著廣泛的分布。隨著現(xiàn)代檢驗技術(shù)的 不斷發(fā)展,對細(xì)菌培養(yǎng)的速度和質(zhì)量要求越來越高。但是傳 統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)方法的耗時長,至少需要18~38h才能夠獲得陽性 結(jié)果,這使得細(xì)菌判定結(jié)果也需要花費不少的時間才能夠得 出確切的結(jié)論[1]。旋轉(zhuǎn)恒溫箱是一種新型培養(yǎng)箱,能夠有效 縮短細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定的耗時,從而提高檢驗工作的效率,且 旋轉(zhuǎn)恒溫箱與進(jìn)口儀器相比,成本更低,具有經(jīng)濟(jì)實惠的優(yōu) 勢,能夠在基層醫(yī)院、縣區(qū)疾控中心推廣使用。文章主要針 對旋轉(zhuǎn)恒溫箱的應(yīng)用效果展開分析,報道如下。
普通恒溫培養(yǎng)箱和旋轉(zhuǎn)恒溫箱陽性顯示所需時間差異 旋轉(zhuǎn)恒溫箱陽性顯示所需時間明顯少于普通恒溫培養(yǎng)箱(P<0.05),見表1。
普通恒溫培養(yǎng)箱和旋轉(zhuǎn)恒溫箱結(jié)果判讀所需時間差異 旋轉(zhuǎn)恒溫箱各物質(zhì)結(jié)果判斷所用時間均明顯少于普通 恒溫培養(yǎng)箱(P<0.05),見表2。
隨著感染性疾病在臨床發(fā)生率的不斷升高,加上食品衛(wèi) 生事件屢屢發(fā)生,使得盡快鑒定致病菌來指導(dǎo)臨床治療和用 藥成為臨床和公共衛(wèi)生的當(dāng)務(wù)之急。細(xì)菌培養(yǎng)是指通過人為 干預(yù)的方式讓提取樣本中的細(xì)菌繁殖速度增加,從而用于鑒 定和應(yīng)用,是一個較為復(fù)雜的技術(shù)。臨床主要是根據(jù)實驗室 培養(yǎng)鑒定細(xì)菌來確定抗菌治療方案。感染性疾病發(fā)生后會引 起炎癥反應(yīng)和器官功能障礙,因此在治療感染性疾病時需要 明確病原體,才能夠采取針對性的治療方案。普通的血常規(guī) 雖然能夠發(fā)現(xiàn)人體炎癥反應(yīng)的發(fā)生,但是無法確定患者的病 原菌,也無法選擇敏感藥物。因此仍需要通過細(xì)菌培養(yǎng)來指 導(dǎo)臨床用藥,同時能夠評估患者的預(yù)后情況。細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果 是抗菌藥物治療方案制定的重要基礎(chǔ),能夠準(zhǔn)確鑒別病原 菌。培養(yǎng)時需要根據(jù)細(xì)菌種類選擇相應(yīng)的培養(yǎng)方法、培養(yǎng)基 以及培養(yǎng)條件[2]。通常先將樣本接種在培養(yǎng)基上進(jìn)行分離培 養(yǎng),之后對培養(yǎng)的菌落形態(tài)、生化以及血清學(xué)反應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一 步的鑒定。目前常用的培養(yǎng)基有肉湯、蛋白胨、氯化鈉、葡 萄糖以及血液等。需氧菌通常都是在有氧環(huán)境中培養(yǎng),而厭 氧菌則是在無氧環(huán)境中培養(yǎng),雖然大部分細(xì)菌的培養(yǎng)時間為 16~38h,但也有特殊細(xì)菌需要培養(yǎng)數(shù)周至數(shù)月左右,例如 結(jié)核菌就需要培養(yǎng)1個月的時間[3]。傳統(tǒng)微生物檢測時間長, 導(dǎo)致在等待檢測結(jié)果的時間內(nèi)只能憑經(jīng)驗用藥,很容易造成 耐藥事件的發(fā)生,不但影響了臨床治療效果,同時導(dǎo)致醫(yī)藥 資源的浪費[4]。因此需要縮短細(xì)菌培養(yǎng)時間,從而為后續(xù)的 藥敏試驗以及治療方案調(diào)整爭取更多的時間。目前一些醫(yī)院 和省級疾控中心引入了高智能化的以及 藥敏分析系統(tǒng),以加速微生物測量效率,但是由于進(jìn)口設(shè)備 昂貴,測量成本高,增加了患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。而基層醫(yī)院和 縣區(qū)疾控中心也無法承擔(dān)這些儀器費用[5]。而本次研究發(fā)現(xiàn) 旋轉(zhuǎn)恒溫箱的應(yīng)用能夠有效縮短細(xì)菌培養(yǎng)時間,從而指導(dǎo)臨床用藥,提高臨床治療效果,從而采取有效的治療 方案,同時可以根據(jù)血清培養(yǎng)結(jié)果來判斷治療的有效性,若 轉(zhuǎn)為陰性則代表治療有效,若仍為陽性則可能出現(xiàn)耐藥的情 況,需要進(jìn)一步選擇其他藥物或采取聯(lián)合治療方案,提高治 療效果,確保臨床用藥的科學(xué)性。
傳統(tǒng)恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)細(xì)菌所需時間大約為16~38h,而旋 轉(zhuǎn)恒溫箱不但具有經(jīng)濟(jì)實惠的優(yōu)勢,且細(xì)菌培養(yǎng)速度快,能 夠獲得與進(jìn)口檢測儀器基本相同的結(jié)果,但成本大幅下降, 可以在基層醫(yī)院和縣區(qū)疾控中心推廣使用[6]。旋轉(zhuǎn)恒溫箱主 要是通過不斷旋轉(zhuǎn)載物網(wǎng),讓培養(yǎng)液保持流動狀態(tài),從而 持續(xù)提供細(xì)菌生長所需營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣,同時能夠不斷沖 刷細(xì)菌繁殖代謝產(chǎn)物;而流動樹脂能夠?qū)⒂卸疚镔|(zhì)與殘余 物質(zhì)吸附掉,讓細(xì)菌處于適宜環(huán)境內(nèi),加速細(xì)菌生長。因此 旋轉(zhuǎn)恒溫箱在細(xì)菌培養(yǎng)的花費時間明顯短于普通恒溫培養(yǎng) 箱。本次研究中旋轉(zhuǎn)恒溫箱陽性顯示所需時間明顯低于普通 恒溫培養(yǎng)箱(P<0.05),這說明了旋轉(zhuǎn)恒溫箱能夠有效縮短 細(xì)菌培養(yǎng)所需時間,提高了細(xì)菌檢測和鑒定的效率。
旋轉(zhuǎn)恒溫箱在細(xì)菌生長繁殖過程中由于還原反應(yīng)會使 得培養(yǎng)基的顏色產(chǎn)生變化,顏色會從原來的粉紅色變成鮮艷 的紫紅色,從而反映了細(xì)菌生長速度,也更容易判斷。傳統(tǒng) 的恒溫培養(yǎng)箱是靜止培養(yǎng),無法快速補(bǔ)充細(xì)菌所需營養(yǎng)物 質(zhì),而細(xì)菌的代謝產(chǎn)物也無法有效清除,因此培養(yǎng)時間較 長,同時其主要是通過肉眼觀察培養(yǎng)基渾濁度變化來判斷菌 落生長,會受到檢驗人員主觀意識的影響。七葉苷、尿素酶、 靛基質(zhì)是細(xì)菌鑒定中的常見生化實驗內(nèi)容,可以根據(jù)實驗結(jié) 果對細(xì)菌進(jìn)行初步分類,從而更好地為細(xì)菌鑒定提供思考方 向,避免細(xì)菌鑒定的盲目性。高濃度培養(yǎng)液能夠提供生長因 子,因此能夠加速細(xì)菌繁殖速度,旋轉(zhuǎn)恒溫箱能夠通過旋轉(zhuǎn) 讓細(xì)菌與培養(yǎng)液更充分的結(jié)合,在不同濃度中表現(xiàn)出的準(zhǔn)確 度也明顯高于普通恒溫培養(yǎng)基。本次研究中旋轉(zhuǎn)恒溫箱各物 質(zhì)結(jié)果判斷所用時間均明顯短于普通恒溫培養(yǎng)箱(P<0.05), 這說明旋轉(zhuǎn)恒溫箱能夠快速獲取鑒定結(jié)果,且不需要特殊的 設(shè)備與昂貴的試劑,更加符合臨床醫(yī)學(xué)和公共衛(wèi)生的需求。
綜上所述,旋轉(zhuǎn)恒溫箱在細(xì)菌培養(yǎng)和鑒定中的效率明顯 高于普通恒溫培養(yǎng)箱,有助于縮短培養(yǎng)時間和結(jié)果判斷時 間,提高檢測效率。
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