詳細介紹
尼康的A1R MP 是一款擁有獨到技術的雙光子顯微成像系統,不僅具備高分辨率檢流計式掃描器(galvanometer scanner),而且還配備了高速共振式掃描器(resonant scanner)。掃描速率在512 X 512像素水平下高達到30幀/秒;在帶狀掃描模式下高可達420幀/秒。新型四通道NDD探測器(non-descanned detectors)具有更高的探測效率、更低的暗電流以及更寬的響應光譜,可以對譜線相近的熒光探針進行實時光譜拆分與識別,并大大提高熒光圖像的對比度。此功能對于雙光子顯微鏡非常重要,因為在雙光子成像時一般只能使用單一的激發波長,往往不可避免地造成自發熒光以及發射光譜的重疊。
多光子顯微鏡
高達420幀/秒成像速率的共振掃描鏡
尼康所*的共振掃描技術,較之于非共振的普通掃描器,大幅提高了寬視場掃描速率,達到了點掃描成像的世界快速率-420幀/秒。利用多光子顯微術的NDD探測器,可以對非常厚的標本進行深部快速成像。尼康的光學同步(optical pixel clock)技術充分保證了超高速圖像的均勻性和穩定性。
*1 NDD(Non-Descanned Detector),與共聚焦技術不同,A1R MP不需要使用小孔濾波(descan)。使得NDD探測器可以安裝在靠近物鏡出光口的位置,從而可以接收到更多的被厚標本散射的信號光,大幅提高靈敏度。通過A1RMP的超高速共振掃描,利用紅外飛秒脈沖激光激發活體組織血管中的血細胞,并以30幀/秒的速率,三通道同時拍攝三色熒光圖像。
箭頭標記的是對白細胞胞核運動的追蹤。
三種熒光探針同時成像:細胞核(藍),內皮細胞層(綠),血漿(紅)。長波長超快激光與超高速掃描器的結合有效阡低光損傷的同時提供了高精度時間分辨率的多光子成像。圖像分辨率:512X512像素,圖像采集速率:30幀/秒,物鏡:60X水鏡。
多光子顯微鏡高靈敏度NDD深部成像
尼康新開發的多光子四通道NDD探測器能夠有效地進行標本深部的顯微成像。較普通探測器而言,NDD的感光元件面積更大,靈敏度更高,并安裝于距離物鏡后出光口(back aperture)近的地方. 該配置有效地提高了對散射熒光的探測效率,具有更高的信噪比(S/N),對諸如活體組織等較厚的標本的拍攝,具有比普通共聚焦顯微鏡更為清晰穩定的圖像質量。
*對于標本深部成像來說,非常重要的一點就是要盡可能多地探測到散射熒光。而實際探測深度主要取決于探測器的靈敏度、受光面積以及安裝位置。