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翱藝儀器(上海)有限公司

說一說超微量分光光度計的核酸定量功能

時間:2023-6-3閱讀:50
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  分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器。由于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量樣本量很小,于是超微量分光光度計應運而生。
 
  今天咱們討論的核酸定量功能是超微量分光光度計使用頻率的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈DNA、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的吸收峰的吸收波長260nm。每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應消光因子。如:1OD的吸光值分別相當于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。
 
  測試后的吸光值經過上述系數的換算,從而得出相應的樣品濃度。除了核酸濃度,分光光度計顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度,如A260/A280的比值,用于評估樣品的純度,因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,等,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。

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