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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>細胞系>>人細胞系>> 3T3-L1小鼠胚胎成纖維細胞
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1×106 1800元 15瓶可售
更新時間:2024-05-30 11:02:42瀏覽次數(shù):214次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線貨號 | XG-X3608 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
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細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品信息:
名稱產(chǎn)品 | 3T3-L1 (小鼠胚胎成纖維細胞) | 產(chǎn)品別稱 | 3T3 L1; 3T3L1; 3T3-L1 ad; NIH-3T3-L1; NIH3T3-L1 |
種屬 | 小鼠 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
換液頻率 | 2-3次/周 | 凍存條件 | 成纖維細胞樣 |
貨號 | XG-X3608 | 組織來源 | 胚胎 |
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認):生長培養(yǎng)基:DMEM+10% NCS+1% P/S
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例1:3-1:4
背景描述3T3-L1細胞是通過克隆分離得到的3T3(swiss小白鼠)的連續(xù)亞株。當(dāng)3T3-L1細胞從快速分裂到長滿且接觸抑制時,3T3-L1細胞經(jīng)過前脂肪向脂肪樣逆轉(zhuǎn)。培養(yǎng)液中,高血清含量可以促進3T3-L1細胞內(nèi)脂肪的積累。
年齡(性別)胚胎
細胞類型自發(fā)永生化細胞
生物安全等級BSL-1
受體表達情況insulin, expressed
保藏機構(gòu)ATCC; CL-173 ATCC; CCL-92.1BCRC; 6015
運輸和保存:
干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
細胞處理:
1) 凍存細胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。
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