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AtT-20小鼠垂體瘤細胞

參  考  價:1500
具體成交價以合同協議為準
  • 型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質

    生產商

  • 所在地

    上海市

規格

1×106 1500元 15瓶可售

更新時間:2024-05-30 10:00:31瀏覽次數:182次

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貨號 XG-X11062 生長特性 懸浮,聚團生長
凍存條件 圓形(成串) 用途 僅供科研研究實驗
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一、細胞基本屬性

細胞名稱

AtT-20小鼠垂體瘤細胞

細胞別稱


種屬來源

小鼠

商品貨號

XG-X11062

 

生長特性 懸浮,聚團生長

細胞形態 圓形(成串)

生長培養基 Ham's F-12K+15% HS+2.5% FBS+1% P/S

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

推薦傳代比例 5×10^5-1×10^6cells/mL

推薦換液頻率 2~3次/周

注意事項 該細胞為懸浮聚團生長,生長速度較慢。

背景描述 AtT-20細胞生長時不貼壁,而結成細胞團懸浮生長。研究表明,AtT-20細胞能抗脊髓灰質炎病毒。

組織來源 垂體;瘤

細胞類型 腫瘤細胞

腫瘤類型 其它腫瘤細胞

生物安全等級 1

基因表達情況 adrenocorticotropic hormone (ACTH)

保藏機構 ATCC; CCL-89 BCRC; 60244 ECACC; 87021902

AtT-20小鼠垂體瘤細胞 

二、細胞培養操作

1) 復蘇細胞:以下細胞培養凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養基,培養過夜)。第三天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

a、細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;

b、添加0.25%消化液約1ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

c、棄上清,沉淀細胞用12ml培養基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,最后放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;

d、待細胞貼壁后,觀察培養結果,之后進行換液培養或傳代。

3) 細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a、細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;

b、添加0.25%消化液約1ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

c、用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

d、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。

AtT-20小鼠垂體瘤細胞 

 

三、培養注意事項

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象 發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養基重懸 細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。

9. 注意:  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

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