操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

注意事項：
1. 接收到細胞，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。

培養步驟：

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

CALCIUM TRIFLUOROMETHANESULFONATE巖石熱解標準物質anti- DLG1 antibody大鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒

POTASSIUM TRIFLUOROMETHANESULFONATE純度標準物質anti- DLG3 antibody大鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒

Scandium trifluoromethanesulfonate煙煤物理特性和化學成分分析標準物質anti- DLG5 antibody大鼠髓脂性蛋白(MBP)ELISA試劑盒

LANTHANUM TRIFLUOROMETHANESULFONATE水中鉀，鈉標準溶液anti- DLGAP3 antibody大鼠種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒

Lithium triflate電導率溶液標準物質anti- DLK1 antibody大鼠前列腺酸性酸酶(PAP)ELISA試劑盒

MAGNESIUM TRIFLUOROMETHANESULFONATE鈦溶液標準物質anti- DLK2 antibody大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒

Sodium trifluoromethanesulfonate濁度標準溶液（無）anti- DLL1-Specific antibody大鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒

NEODYMIUM(III) TRIFLUOROMETHANESULFONATE納氏試劑anti- DLL4 antibody大鼠卵巢癌標志物CA125ELISA試劑盒

人膠質瘤組織源細胞Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..酸化酸神經膜抗體anti- TBXAS1 antibodyⅤ型膠原α2(COL5α2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

frozen酸化DNA損傷修復基因XRCC9抗體anti- TC10 antibody細胞色素P450家族成員1A2(CYP1A2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Rhodobacter sphaeroides (van Niel) Imhoff e ..細絲蛋白A抗體anti- TCEA1 antibodyC1q腫瘤壞死因子相關蛋白9(C1QTNF9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Homo sapiens, humanDNA損傷修復基因XRCC9抗體anti- TCEA3 antibody角蛋白16(KRT16)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

frozen酸化載脂蛋白A1抗體anti- TCEAL7 antibody層粘連蛋白γ1(LAMγ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Homo sapiens, human細胞外基質蛋白FRAS1抗體anti- TCEB1 antibodySmad同源物2(Smad2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

freeze-dried叉頭蛋白N1抗體anti- TCEB2 antibody神經外營養蛋白1(NXPH1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白2/5抗體anti- TCEB3 antibody唾液酸酶2(SIAL2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)