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產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 大鼠腦膜成纖維細胞 |
規(guī)格 | 5×105 |
貨號 | XG-X6594 |
培養(yǎng)步驟:
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
NA烯禾啶anti- CYB5B antibody大鼠凝聚素(CLU)ELISA試劑盒
NA烯草酮鋰鹽anti- CYB5R1 antibody大鼠轉化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒
MALT EXTRACT全血鉛鎘成分分析標準物質anti- CYB5R3 antibody大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒
NA酸酯、乳酸酯和己酸酯醇水溶液標準物質anti- CYB5R3 antibody大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒
GALLOCYANINE糠醛醇水溶液標準物質anti- CYB5R4 antibody大鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒
Propyl gallateβ-苯醇醇水溶液標準物質anti- CYC1 antibody大鼠D-乳酸脫酶(D-LDH)ELISA試劑盒
Fuchsin basic;Magenta;Basic Magenta;Basic rubin;Basic violet 14;C.I. 42510轉基因水稻BT63(TT51-1)質粒分子anti- Cyclin A1 antibody大鼠胸腺活化調節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒
NA轉基因玉米NK603質粒分子anti- Cyclin A2 antibody大鼠(CH)ELISA試劑盒
大鼠腦膜成纖維細胞Rattus norvegicus, ratEMSY蛋白抗體anti- SSTR1 antibodyL-型電壓依賴性鈣離子通道α1D亞基(CACNα1D)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Homo sapiens, human breast; mammary gland/d ..延伸突觸蛋白1抗體anti- SSTR2 antibody白介素1β(IL1β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Homo sapiens, human connective tissue延伸突觸蛋白2抗體anti- SSTR3 antibody神經纖維素2(NF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Homo sapiens, human核苷酸內焦酸酶/酸二酯酶1抗體anti- SSTR5 antibody母系蛋白2(MATN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..轉錄因子Ets差異基因5抗體anti- SSU72 antibody皮質酮(CORT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Thermoascus taitungiacus Chen et Chen, tele ..CAST1蛋白抗體anti- SSX1 antibody抗利尿激素(ADH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Candida albicans (Robin) Berkhout核輸出蛋白5抗體anti- SSX2IP antibody酪胺酸酶(TYR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Homo sapiens, human早期內吞體相關蛋白1抗體anti- SSX4 antibody組織蛋白酶G(CTSG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
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