當前位置:上海西格生物科技有限公司>>細胞培養>>原代細胞>> 小鼠結腸平滑肌細胞
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | 小鼠結腸平滑肌細胞 |
規格 | 5×105 |
貨號 | XG-X6466 |
注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
培養步驟:
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
Agar-S.S總氮標準品(標樣)anti- C9orf41 antibody人26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA試劑盒
NA總標準品(標樣)anti- C9orf46 antibody人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒
Hydrogen Sulfide Indole Motility Medium錳標準品(標樣)anti- C9orf61 antibody人胎盤性酸酶(PLAP)ELISA試劑盒
TCBS AGAR FOR MICROBIOLOGY銅標準品(標樣)anti- C9orf72 antibody人受體激酶(RTKs)ELISA試劑盒
Triethyleneglycol;Di-β-hydroxyethoxyethane;2,2′-Ethylene dioxydiethanol;Glycol bis(hydroxyethyl)ether;Triglycol;Trigol;TEG六價鉻標準品(標樣)anti- C9orf72 antibody人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒
NA化學需氧量-鉻(CODCr)(標樣)anti- C9orf72 antibody人黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒
NA硝酸鹽(以氮計)(標樣)anti- C9orf78 antibody人可溶性脂酶A2(sPL-A2)ELISA試劑盒
PHENACYL BROMIDE硫酸鹽標準品(標樣)anti- C9orf9 antibody人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒
小鼠結腸平滑肌細胞Human sAC (Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit粘附分子相關蛋白a1抗體anti- RENALASE antibody尿皮質素3(UCN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human sFMC (Soluble Fibrin Monomer Complex) ELISA Kit鈣調酸酶抗體anti- RENALASE antibody半蛋白酶抑制劑B(CSTB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human PECAM1/CD31 (Platelet/Endothelial Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit鈣蛋白酶1抗體anti- Renin antibody信號素7A(SEMA7A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human COL18α1 (Collagen Type XVIII Alpha 1) ELISA Kit鈣調節蛋白-1抗體anti- Renin receptor,ATP6AP2 antibody肌肽酶1(CNDP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human ApoB48 (Apolipoprotein B48) ELISA Kit半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端)anti- REPS2 antibody泛素結合酶E2C(UBE2C)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human sTNF-1 (Soluble Tumor Necrosis Factor 1) ELISA Kit周期素A2抗體anti- RERG antibodyKlotho蛋白(KL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human MITF (Microphthalmia Associated Transcription Factor) ELISA Kit鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2b/2γ抗體anti- REST antibodyVEGF共調節趨化因子1(VCC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human BMP-5 (Bone Morphogenetic Protein 5) ELISA Kit 細胞凋亡敏感性基因抗體anti- REX1 antibodyVGF神經生長因子誘導蛋白(VGF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,環保在線對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。