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HELF 人胚肺成纖維細胞

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質生產商

所  在  地上海市

更新時間:2020-10-19 09:51:06瀏覽次數(shù):248次

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      描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

      發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務標準。

      保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。

產品名稱

 HELF 人胚肺成纖維細胞

 規(guī)格

 T25m2

 貨號

 XG-X6355

 

培養(yǎng)步驟:

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

1,5-Dihydroxynaphthalene酮中特硫溶液標準物質anti- AKR1CL2 antibody人血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒

Sevoflurane Related CoMpound C;1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol固體水分標準物質anti- AKR1D1 antibody人皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒

Malonaldehyde bis(diethyl acetal)固體水分標準物質anti- AKR7A2 antibody人前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒

1-10-Phenanthroline Monohydrate固體水分標準物質anti- AKR7A3 antibody人雙睪酮(DHT)ELISA試劑盒

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1,1'-DIANTHRIMIDE二水合酒石酸鈉水分標準物質anti- AKT1 antibody人孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒

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HELF 人胚肺成纖維細胞Human CASP14 (Caspase 14) ELISA Kit銅代謝結構域蛋白3抗體anti- PHF14 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CASP8 (Caspase 8) ELISA Kit銅代謝結構域蛋白8抗體anti- PHF17 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CASP4 (Caspase 4) ELISA Kit抗體anti- PHF19 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit銅代謝結構域蛋白10抗體anti- PHF2 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CAD (Caspase Activated Deoxyribonuclease) ELISA Kit細胞表面趨化因子受體4相關蛋白2抗體anti- PHF20 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CASP 9 (Caspase 9) ELISA Kit24S-羥化酶anti- PHF21A antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CTNNα1 (Catenin, Alpha 1) ELISA Kit 肉棕櫚酰基轉移酶2抗體anti- PHF5A antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CTNNβ1 (Catenin, Beta 1) ELISA Kit 肉氧位基轉移酶抗體anti- PHF6 antibody組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

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