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操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | PC-3人前列腺癌細胞 |
規格 | T25m2 |
貨號 | XG-X6335 |
注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
培養步驟:
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide肉糜中狐貍源性成分(定性)anti- ACSL1 antibody人中期因子(MK)ELISA試劑盒
Zinc hydroxide肉糜中貓源性成分(定性)anti- ACSL3 antibody人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒
L-Serine;L-β-Hydroxyalanine;(S)-2-AMino-3-hydroxypropionic acid;(S)-(+)-Serine;L-3-Hydroxy-α-alanine;Ser;S食用油中鄰苯二酸二辛酯(DEHP)、鄰苯二酸二酯(DBP)anti- ACSL4/FACL4 antibody人低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒
2-ChloroacetaMideClCH2CONH2;2-Chloroeth*食用油中B1anti- ACSL5 antibody人轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒
3,4-Dichloroaniline食用油中基羥基茴香醚(BHA)、二基羥基苯(BHT)、叔基對苯二anti- ACSM2A antibody人P53(P53)ELISA試劑盒
Boron tribroMide食用油中苯并芘anti- ACSM3 antibody人內皮抑素(ES)ELISA試劑盒
Thiophene食用油中酸價、過值anti- ACSM5 antibody人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒
1,3-Propanediol;TriMethylene glycol啤酒中酒精度、原麥芽汁濃度、總酸anti- ACSS1 antibody人基質金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒
PC-3人前列腺癌細胞Human IGFBP-6 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框117抗體anti- PCTP antibody前動力蛋白受體1(PKR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human INSR (Insulin Receptor) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框118抗體anti- PCYOX1 antibody前動力蛋白受體1(PKR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human APC (Activated Protein C) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框144抗體anti- PCYT1B antibody酮酸激酶(PK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human APLN (Apelin) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框151抗體anti- PCYT2 antibody酮酸激酶(PK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human AP13 (Apelin 13) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框187抗體anti- PD-1/CD279 antibody基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human AP36 (Apelin 36) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框152抗體anti- PD-1/CD279 antibody基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human Apo A1-Ab (Anti-Apolipoprotein A1 Antibody) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框165抗體anti- PDAP1 antibody膽囊收縮素A受體(CCKAR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Human LCN1 (Lipocalin 1) ELISA Kit20號染色體開放閱讀框166抗體anti- PDCD10 antibody膽囊收縮素A受體(CCKAR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
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