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鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質生產商

所  在  地上海市

更新時間:2020-09-28 15:08:26瀏覽次數:132次

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鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

產品名稱:鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Abalone Herpes-like Virus(AbHV)
貨號:XG01P3211
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

實時定量PCR:
①β-actin陽性模板的標準梯度制備 陽性模板的濃度為1011,反應前取3μl按10倍稀釋(加水27μl并充分混勻)為1010,依次稀釋至109、108、107、106、105、104,以備用。
②反應體系如下:
標準品反應體系
序號  反應物  劑量
1   SYBR Green 1 染料  10μl
2  陽性模板上游引物F  0.5μl
3  陽性模板下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  陽性模板DNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  總體積  50μl
輕彈管底將溶液混合,6000rpm短暫離心。

基因反應體系:
序號  反應物  劑量
1  SYBR Green 1 染料  10μl
2  內參照上游引物F  0.5μl
3  內參照下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  待測樣品cDNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  總體積  50μl
輕彈管底將溶液混合,6000rpm短暫離心。
③制備好的陽性標準品和檢測樣本同時上機,反應條件為:93℃ 2分鐘,然后93℃ 1分鐘,55℃ 2分鐘,共40個循環。
PCR特異性:
1.primers design
這是重要的一步。理想的,只同目的序列兩側的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面一些條件:
1)足夠長,18~24bp,以保證特異性,當然,不是說越長越好,太長的primer同樣會降低特異性,并且降低產量;
2)GC%,40%~60%;
3)5'端和中間序列要多GC,以增加穩定性;
4)避免3'端GCrich,個BASE不要有GC,或者5個有3個不要是GC。
5)避免3'端的互補,否則,容易造成DIMER;
6)避免3'端的錯配;
7)避免內部形成二級結構;
8)附加序列(RT site,Promoter sequence)加到5'端,在算Tm值時不算,但在檢測互補和二級結構要加上它們;
9)使用兼并primer時,要參考密碼子使用表,注意:生物偏好性,不要在3'端使用兼并primer,并使用較高的primer濃度(1μM~3μM);
10)學會使用一種design software,PP5,Oligo6,DNA star,Vector NTI,Online design et al。
Rhesus antibody Rh PCANAP2/Prostein  前列腺癌相關蛋白2抗體 規格  0.2ml
Rhesus antibody Rh P-cadherin  P-鈣粘附分子抗體 規格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PBR/DBI/TSPO  外周苯二氮受體抗體 規格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PBOV1  前列腺癌和乳腺癌高表達蛋白抗體 規格  0.2ml
Rhesus antibody Rh PBLD/MAWBP  MAWD結合蛋白抗體 規格  0.2ml
Rhesus antibody Rh PBK/TOPK  PDZ連接激酶/T-LAK細胞源蛋白激酶抗體 規格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PBEF1(CT)  內脂素/內臟脂肪素(C端抗體) 規格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PBEF(NT)  內脂素/內臟脂肪素抗體(N端) 規格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PBEF (CT)  內脂素/前B細胞克隆增強因子-2(C端抗體) 規格  0.1ml
Rhesus antibody Rh Paxillin  樁蛋白Paxillin抗體 規格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PAX9  配對盒基因9抗體 規格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PAX8  配對盒基因8抗體 規格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PAX7  配對盒基因7抗體 規格  0.2ml
Rhesus antibody Rh PAX6  轉錄因子Pax6抗體 規格  0.2ml
Rhesus antibody Rh PAX5  配對盒基因5抗體 規格  0.1ml用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗(SN標準) Methyl Red Voges Proskauer Broth MR-VP培養基     
用于大腸菌群的固體平板檢測(SN標準) Violet Red Bile Agar 結晶紫中性紅膽鹽瓊脂 (VRBA)    
用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(GB標準) Simmons Citrate Agar 西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂     
用于腸道菌計數和腸桿菌科鑒別(MERCK方法) Violet Red Bile Dextrose Agar   腸道菌計數瓊脂 (VRBDA)     
用于常用細菌斜面傳代及室溫保存 Strain Store Medium 菌種保存培養基   
用于飲用水,水源水中總大腸菌群的測定(GB標準) Lactose Peptone Broth 乳糖蛋白胨培養液    
用于運送腸道致病菌標本 Cary-Blair Transport Medium Cary-Blair 氏運送培養基       
營養非常豐富,用各種細菌的基礎培養基(AFNOR EP IDF標準) Columbia Blood Agar Base 哥倫比亞血瓊脂基礎
用于飲用天然礦泉水中大腸桿菌的檢驗(GB標準) Brilliant Green Lactose Medium 亮綠乳糖培養基   
用于腸道菌的增菌培養(GB、FDA標準) Enterobacteria Enrichment Broth 腸道菌增菌肉湯(EE肉湯)   
用于細菌總數測定 TTC Nutrient Agar TTC營養瓊脂   
用于細菌培養 LB Broth LB肉湯    
用于細菌培養 LB Nutrient Agar LB營養瓊脂   
用于苯脫氨酶試驗 Phenylalanine Deaminase  Medium 苯脫氨酶培養基   
用于大腸桿菌的熒光檢測(SN標準) Columbia- MUG Medium 哥倫比亞MUG培養基
用于海生細菌的培養和計數 2216E Agar 2216E瓊脂
用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(Acumedia方法) Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 腸球菌瓊脂(膽鹽-七葉苷-疊氮鈉瓊脂)
鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒用于培養擬桿菌 BDS Medium BDS培養基
用于細菌的綜合生化試驗 Dextrose Agar 葡萄糖瓊脂
用于細菌的糖發酵試驗 Andrade’s Carbohydrate Broth Andrade氏糖類肉湯
用于細菌枸椽酸鹽試驗(SN標準) Korser Citrate Sodium Broth Korser氏枸椽酸鹽肉湯
用于大腸菌群的確診試驗(APHA) Endo Agar Endo 培養基
 熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

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