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上海西格生物科技有限公司
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生化試劑操作流程的步驟

時間:2020/11/11閱讀:2376
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生化試劑試驗原理:

生化試劑是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。

生化試劑操作流程:

1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。

3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。

4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。

5. 生化試劑內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。

6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。

7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。 

生化試劑樣本處理:

1.剛取得的新鮮組織樣本用PBS洗凈。

2.準確稱取50mg組織,加入1ml勻漿緩沖液A,用玻璃勻漿器充分勻漿。

3.在1000g,4℃離心10分鐘,棄沉淀,取上清。 

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