1. A260/A280、A260/A230比值受溶液酸堿度及離子強度的影響，如酸溶液會使A260/A280比值降低，低離子強度和低 pH 溶液會增加 280 nm 處的光吸收值。因此必須確保空白檢測和溶解樣品所用Buffer的離子濃度和pH值一致。
2. 濃度接近2 ng/μl濃度的樣品可能會導致不可靠的260/280和/或260/230的比值。
3. 樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素，由于樣品中不可避免存在一些細小的顆粒，尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在會干擾測試效果。樣品的濃度不能過低，或者過高(超過光度計的測試范圍)。
4. 樣品混合要充分，否則吸光值太低，甚至出現負值；混合液不能存在氣泡，空白液無懸浮物，否則讀數漂移劇烈。樣品混合不均勻會直接導致檢測不確定，重復性低。
5. 樣品檢測上樣量不能太少，必須能夠保證能后連接上下兩根光纖形成光柱，從而使得檢測正常進行。
6. 樣品臺清潔，在檢測前，檢測后以及連續使用儀器30分鐘后均需要對上下接觸樣品的部位用雙蒸水或純水擦拭。
7. 切忌不可用噴壺在樣品臺上噴射，以防液體液體進入儀器內部造成損壞。
8. 切忌不可用洗滌劑或異丙醇清潔基座。
9. 儀器放置位置應當遠離通風口，以免液滴蒸發太快導致濃度讀數偏大。
