技術(shù)文章
PCR實驗室污染分類
閱讀:1777 發(fā)布時間:2020-12-17樣本間交叉污染
主要是在采(取)樣的過程中,由于取樣工具之間的交叉造成污染;或者在核酸提取的過程中,由于移液器、離心管等使用不當(dāng)導(dǎo)致的污染。
PCR試劑的污染
主要是在PCR試劑配制過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。
克隆質(zhì)粒的污染
在實驗室操作中經(jīng)常會用到陽性參考品,這些陽性參考品大多數(shù)是由某些克隆質(zhì)粒制作而成,克隆質(zhì)粒在單位容積內(nèi)濃度高,不小心使用極易造成污染。
PCR擴增產(chǎn)物污染
這是PCR反應(yīng)中zui主要zui常見的污染問題。因為PCR產(chǎn)物拷貝量大,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可造成假陽性結(jié)果。還有一種容易忽視,zui可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染,在空氣與液體面摩擦?xí)r就可形成氣溶膠,據(jù)計算一個氣溶膠顆粒可含4.8萬拷貝,因而由其造成的污染是一個值得特別重視的問題。