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伊萊博生物科技（上海）有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè),大中小型動(dòng)物實(shí)驗(yàn),細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù) |
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上海市
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一、肥胖背景簡(jiǎn)介
肥胖（obesity）是指一定程度的明顯超重與脂肪層過(guò)厚，是體內(nèi)脂肪，尤其是甘油三酯積聚過(guò)多而導(dǎo)致的一種狀態(tài)。由于食物攝入過(guò)多或機(jī)體代謝的改變而導(dǎo)致體內(nèi)脂肪積聚過(guò)多，造成體重過(guò)度增長(zhǎng)，并引起人體病理、生理改變或潛伏。隨著人們生活水平的提高,飲食因素成為誘發(fā)肥胖的重要因素之一。
二、肥胖模型簡(jiǎn)介
肥胖動(dòng)物模型構(gòu)建主要通過(guò)特定的飼養(yǎng)方式或遺傳改造使動(dòng)物產(chǎn)生肥胖癥狀，從而模擬人類的肥胖狀態(tài)，用于研究肥胖的發(fā)病機(jī)制、相關(guān)疾病的發(fā)展以及潛在的治療方法。
三、肥胖動(dòng)物模型構(gòu)建方法
3.1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
C57小鼠
3.2、實(shí)驗(yàn)材料
高糖高脂飼料
3.3、模型構(gòu)建
藥物誘導(dǎo)
1. 谷an酸鈉（MSG）誘導(dǎo)
新生小鼠或大鼠皮下注射MSG可誘導(dǎo)其產(chǎn)生肥胖。
高劑量谷an酸鈉可以損傷下丘腦弓狀核及其鄰近區(qū)域，導(dǎo)致攝食及能量代謝紊亂，引起肥胖。谷an酸鈉誘導(dǎo)的肥胖會(huì)出現(xiàn)高血糖、高脂血癥和胰島素抵抗，但這種方法會(huì)抑制肝脂質(zhì)沉積，所以除了肥胖外它還可以用作非酒精性脂肪肝的動(dòng)物模型。
實(shí)驗(yàn)方法：新生ICR乳鼠自出生當(dāng)天開(kāi)始每日注射谷an酸鈉（MSG）連續(xù)4ｄ，每籠1只母鼠喂養(yǎng)乳鼠3～6只，飼以基礎(chǔ)飼料，任意飲氯化水，置于標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物室。在6周齡時(shí)連續(xù)4ｄ測(cè)定每籠攝入和散落的飼料量，計(jì)算平均飼料和水?dāng)z入量·鼠。實(shí)驗(yàn)期間定時(shí)測(cè)定尿糖、血糖、胰島素、總膽gu醇（TC），TG，低密度脂蛋白-膽gu醇（LDL-C）、高密度脂蛋白-膽gu醇（HDL-C）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）以及做糖耐量試驗(yàn)、胰島素耐受試驗(yàn)?并測(cè)量小鼠從口至肛men的長(zhǎng)度、稱重。用方程式：體重（ｇ）／體長(zhǎng)2（ｃｍ2）計(jì)算身體質(zhì)量指數(shù)（BMI）。實(shí)驗(yàn)?zāi)┧行∈笕「巍⒁取⒛I、眼、坐骨神經(jīng)、內(nèi)臟白色脂肪組織、肩胛間棕色脂肪組織、主動(dòng)脈和大腦稱重，然后作病理檢查。
2. 金硫葡萄糖（GTG）致肥胖
給成年小鼠腹腔注射GTG可誘導(dǎo)其產(chǎn)生肥胖，金硫葡萄糖是損傷下丘腦腹內(nèi)側(cè)核，增加食欲引起肥胖。其作用機(jī)制尚不明確且金硫葡萄糖價(jià)格高昂、造模時(shí)間長(zhǎng)且腹腔注射動(dòng)物死亡率高限制了它的應(yīng)用。
這種動(dòng)物的血糖升高，血清胰島素水平也升高；從其胰島分離的細(xì)胞的胰島素合成顯著增加cAMP含量和葡萄糖氧化亦顯著增加。胰島素敏感性受抑制，胰島肥大伴脫顆粒，提示該肥胖與B細(xì)胞反應(yīng)改變有關(guān)。
研究發(fā)現(xiàn)，在注射GTG后2周，動(dòng)物心臟對(duì)葡萄糖致丙酮酸脫氫酶升高的反應(yīng)減弱，在WAT和BAT升高2～3倍，而這些反應(yīng)在給藥后5～10周消失。肝中糖元儲(chǔ)存增加，磷酸化酶的激活及磷酸葡萄糖均顯著增加，這可能與胰島素抵抗及葡萄糖耐量異常有關(guān)。
四、模型驗(yàn)證
①一般情況觀察:每天觀察動(dòng)物的精神狀態(tài)、皮毛光澤、活動(dòng)、食欲、大便等情況，并詳細(xì)記錄。
②體重:每周稱重1次。
③體長(zhǎng)及Lee's指數(shù):實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，麻醉后測(cè)量體長(zhǎng)(大鼠從鼻至肛men的長(zhǎng)度)，并根據(jù)公式［Lee's指數(shù)=體重(g)1/3×103/體長(zhǎng)(cm)］計(jì)算Lee's指數(shù)。
④脂肪濕重及脂肪指數(shù):實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，取體脂(網(wǎng)膜、睪周及腎周脂肪)并稱重，計(jì)算脂肪指數(shù)。脂肪指數(shù)(%)=(腎周脂肪+睪周脂肪+網(wǎng)膜脂肪)/體重×100。
⑤血脂測(cè)定:實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，大鼠經(jīng)24h禁食麻醉自頸動(dòng)脈采血，離心并分離出血清，用全自動(dòng)生hua分析儀檢測(cè)血清總膽gu醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽gu醇(HDL－C)和低密度脂蛋白膽gu醇(LDL－C)水平。
⑥肝脂測(cè)定:取肝臟左葉重約1g，在1∶9勻漿介質(zhì)(甲醇∶yi醚=1∶1)中，以電動(dòng)勻漿機(jī)4℃下制成10%勻漿，4℃下4000r/min離心10min，提取上清液，采用全自動(dòng)生hua分析儀檢測(cè)TC、TG。
五、小結(jié)
高營(yíng)養(yǎng)飼料飼喂法制作營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠模型造模方法簡(jiǎn)單可靠，成本低，模型穩(wěn)定，適用性強(qiáng)，造模成功率高，一定程度上復(fù)制了人類單純性肥胖發(fā)病狀況。常見(jiàn)的動(dòng)物模型有小鼠和大鼠等
六、參考文獻(xiàn)
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