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更新時間：2024-11-01 16:01:28瀏覽次數(shù)：1341
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Timm染色是一種生物化學中常用的染色方法，它主要用于顯示組織細胞內(nèi)重金屬的分布，特別是鋅離子的分布。這種方法在神經(jīng)科學研究中尤為重要，因為它可以顯示苔蘚纖維末梢的分布情況，苔蘚纖維是腦內(nèi)含鋅量高的區(qū)域。
以下是Timm染色的基本步驟：
1.標本制備?：這通常包括開胸經(jīng)左心室連續(xù)灌流、斷頭取腦、組織固定、蔗糖磷酸緩沖液浸泡以及低溫防護等步驟。這些步驟的目的是為了獲得適合染色的腦組織切片。
2.切片?：通過中隔海馬進行恒溫冷凍冠狀切片，切片在磷酸緩沖液中連續(xù)收集，片厚通常為30至50微米。
3.染色?：將切片貼附于多聚賴氨酸處理過的載玻片上，晾干后進行Timm染色。染色過程需要在避光的條件下進行，通常使用Timm顯影劑在26℃的水浴箱或恒溫搖床中染色90至150分鐘。
4.沖洗與封片?：染色后，切片用蒸餾水沖洗幾遍，可以選擇進行尼氏染色復染，也可不復染。最后，晾干切片并用中性樹脂封膠片。
需要注意的是，Timm染色方法包括一些關鍵的試劑和步驟，這些都需要嚴格按照實驗指南或試劑盒說明書進行操作。此外，實驗過程中還需要注意一些細節(jié)問題，如保持切片的濕潤、避免氣泡產(chǎn)生等，以確保染色的質(zhì)量和結(jié)果的準確性。
Timm染色實驗流程：
1.切片貼附于多聚賴氨酸處理過的載玻片上，-20℃保存；
2.做的時候拿出來晾干 ，約10分鐘；
3.把Timm顯影劑倒入修復盒中，放在在26℃的水浴箱或恒溫搖床里染色90-150 min,染色在避光的條件下進行；
4.染色后，切片用蒸餾水沖洗幾遍,可以尼式染色復染，也可不復染；
5.晾干，中性樹脂封膠片。
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實驗周期：3-4周
