高效液相色譜(HPLC)是一種進行物質分離、鑒定和定量的分析方法。與其它通常采用梯度模式的各種生物聚合物HPLC(離子交換、疏水相互作用和反相色譜)不同，SEC(尺寸排阻色譜法)通常采用等度方法。
尺寸排阻色譜法
尺寸排阻色譜法(SEC)包括凝膠滲透色譜法(GPC)和凝膠過濾色譜法(在含水條件下實行的一種特殊SEC法)，是利用球形顆粒多孔基質作為固定相的一種分析方法。小分子能夠滲透到篩孔中并被截留。與此相反，大分子則不能進入篩孔，只能以線性流速通過色譜柱。因此，分子根據其大小進行分離，大分子先從色譜柱中洗脫出來，而后才是小分子從色譜柱中洗脫出來。
SEC是一種常用于生物聚合物的分離方法。目前的應用領域如下：
測定分子量，例如抗體免疫球蛋白G。
作為一個研究構象變化的工具用于下游加工(后續加工和產品凈化)。
特殊應用：用于肽和蛋白質混合物的自動化樣品制備的SEC限制介入色譜柱。
幾十年來，生物制藥在醫藥市場上已經占據了重要地位。在這些生物制藥產品中，有醫藥用酶、、各種激素——如胰島素、依泊汀或生長激素、單克隆抗體(mAbs)和生物工程疫苗。
SEC分析是下游加工中的標準方法，用于通過重組生產治療性蛋白質和抗體來確定生物制造期間靶分子的純度和聚集狀態。
確定分子量間的差異來檢測污染物和聚合物是基于高純洗脫液的使用，高純洗脫液不會與固相發生任何反應。
SEC所需特殊質量的水可以從各個制造商處購買，或者直接使用艾柯實驗室純化水系統在現場按需直接制備。
水的實驗評估
本文對重組單克隆抗體進行了定性研究，作為SEC分析使用的一個例子。所使用的解決方案源于我們的內部方案。
在上游加工(溶液制備)期間，發酵培養基(宿主細胞DNA、宿主細胞蛋白質、培養基成分，如白蛋白、胰島素和轉鐵蛋白)以及微生物和內毒素產生的雜質和污染物必須在下游加工中減少。這一過程也是雜質的來源(蛋白酶的加入，蛋白A的泄漏)。mAb產物本身也能形成雜質，例如分裂的或聚集的抗體，mAb的脫酰胺或氧化形式或錯誤折疊分子，對此必須進行檢測。
對于靶蛋白純度的質量控制，根據其分子量分離，采用SEC等方法來檢測聚集的抗體。
