投入接種液是為了保證有一定量的微生物降解水中的有機物，接種液的量以使5日耗氧0.1mg/L以下為佳。使用由金屬蒸餾器制備的蒸餾水作為稀釋水時，應注意檢查其中的金屬離子含量，以避免因此抑制微生物繁殖和代謝。為確保稀釋水中溶解氧接近飽和，必要時可通入凈化空氣或純氧，然后于在20oC培養箱中放置一定時間，使之與空氣中氧分壓達到平衡。稀釋倍數的確定是以培養5日耗氧大于2mg/L，剩余溶解氧大于1mg/L為原則。稀釋倍數過大或過小，都會導致檢驗失敗。小型污水處理一體化設備小型污水處理一體化設備

而且由于BOD5分析周期較長，一旦出現類似情況，就無法以原樣補測。初測某一工業廢水的BOD5時，可以測定其CODCr，然后查閱參考已有的水質類似的廢水的有關監測數據，初步確定待測水樣BOD5/CODCr值，據此推算出BOD5的大致范圍和確定稀釋倍數。對含有抑制或殺滅好氧微生物代謝活動的物質的水樣，

直接用通常方法測定BOD5的結果會偏離實際值，必須在測定前做相應的預處理，這些對BOD5測定有影響的物質和因素包括重金屬及其他有毒的無機物或有機物、余氯等氧化性物質、pH值過高或過低等。BOD5的測定是一個生物化學耗氧過程，水樣中的微生物以水中有機物為營養生長繁殖的同時，分解有機物并消耗了水中的溶解氧，因此水樣中必須含有一定數量的對其中有機物有降解能力的微生物。