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雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒實驗過程血清為什么要這么處理?

時間:2020/12/12閱讀:948
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  雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒的處理都有一定的標準和要求,在我們拿到試劑盒之后,我們會發現每個試劑盒都有相應的說明,并且每個說明將包括樣品的稀釋比例和稀釋劑。那么你知道為什么ELISA測試血清樣品需要稀釋?原因有兩個:
  1、比賽按捺對比明顯,應稀釋比賽物;
  2、為了減少非特異性反應,可以充分反映特異性抗原-抗體反應。
  可用普通PBS稀釋血清,并添加1%BSA,可有效降低ELISA背景。當然,如果您太麻煩,我認為用鹽水代替PBS并不大。無論使用直接競爭還是直接競爭,都必須事先確認血清的稀釋倍數,但不必太小。您可以進行初步實驗,并選擇OD為1.0左右的稀釋因子,即ELISA中的陰性孔。OD為1.0,因此以這種方式繪制的曲線很敏感。
 

雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒

  在雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒實驗中稀釋血清的過程:
  1、將蛋白質稀釋一定倍數,例如10倍或20倍稀釋(這可以大致確定一個參數),并進行一系列稀釋以包被抗原Micro反應板。
  2、用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清孵育并洗滌,然后加入酶結合物進行反應,孵育并洗滌后,加入底物溶液顯色,停止反應并分別測量OD值選擇OD≥1.0的抗原稀釋液作為合適的包被濃度。通常,雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒稀釋始終選擇略大于1.0的O.D值,而不選擇小于1.0的抗原濃度,陰性是指血清O.D值要求。
 

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