泛素化多肽序列 - 特異性抗體
服務編號：YKSP-1012
服務標準：
1.泛素化多肽ELISA效價大于80，000
2.泛素化多肽與非泛素化多肽效價區分大于16倍（ELISA、Dot Blot）
3.3-5 mg泛素化特異性抗體
交付的材料：
1.0.5 ml免疫前血清, 1 ml 免疫后血清
2.總計3-5mg抗原親和純化的泛素化特異性抗體，
3.1 mg泛素化多肽，1 mg非泛素化多肽，0.1 mg泛素多肽-BSA偶聯物，0.1 mg非泛素化多肽-BSA偶聯物
4.Elisa數據報告，Dot Blot報告，完整項目報告
可變區和恒定區
通過分析不同Ig重鏈和輕鏈的氨基酸序列發現，重鏈和輕鏈靠近N端的約1 10個氨基酸序列變化很大，其他部分氨基酸序列相對恒定。因此，將Ig輕鏈和重鏈中靠近N端氨基酸序列變化較大的區域稱為可變區(variable region，V)，分別占重鏈和輕鏈的1/4和1/2；將靠近C端的氨基酸序列相對穩定的區域，稱為恒定區(constant region，C)，分別占重鏈和輕鏈的3/4和1/2。
1．可變區 重鏈和輕鏈的V區分別稱為VH和VL。VH和VL中各含有3個氨基酸組成和排列順序高度可變的區域，稱為高變區(hypervariable region，HVR)或互補決定區(complementarity determining region，CDR)， 包括HVRl(CDRl)、HVR2(CDR2) 和HVR3(CDR3)，其中，HVR3(CDR3)變化程度更高。VH的3個高變區分別位于29～31、49～58和95～102位氨基酸，而VL的3個高變區分別位于28～35、49～56和91～98位氨基酸。VH和VL的3個CDR共同組成Ig的抗原結合部位(antigen-binding site)，決定抗體的特異性，是抗體識別及結合抗原的部位。在V區中，CDR之外區域的氨基酸組成和排列順序相對保守，稱為骨架區(framework region，FR)。VH或VL各有四個骨架區，分別用 FR1、FR2、FR3和FR4表示。
2．恒定區 重鏈和輕鏈的C區分別稱為CH和CL。不同型(κ或λ)Ig的CL長度基本*，但是不同類Ig的CH長度不同，例如IgG、IgA和IgD包括CH1、CH2和CH3，而IgM和IgE則包括CHl、CH2、CH3和CH4。
(三)鉸鏈區
鉸鏈區(hinge region)位于CH1與CH2之間，富含*，易伸展彎曲，從而改變抗原結合部位之間的距離，有利于抗體結合位于不同位置的抗原表位。鉸鏈區易被木瓜蛋白酶、*等水解，產生不同的水解片段。不同類Ig的鉸鏈區不盡相同，例如人IgGl、IgG2、IgG4和IgA的鉸鏈區較短，IgG3和IgD的鉸鏈區較長，而IgM和IgE無鉸鏈區。
二、抗體的結構域
Ig分子的兩條重鏈和兩條輕鏈都可折疊成數個球形結構域(domain)，每個結構域行使其相應的功能。輕鏈有VL和CL兩個結構域；IgG、IgA和IgD的重鏈有VH、CH1、CH2和CH3四個結構域；IgM和IgE的重鏈有五個結構域，即多一個CH4結構域。每個結構域由約110個氨基酸組成，氨基酸序列具有相似性，其二級結構是由幾條多肽鏈折疊形成的兩個反向平行的β片層(anti—parallel β sheet)構成的，兩個β片層中心的兩個半*殘基由一個鏈內二硫鍵垂直連接，形成一個“β桶狀(βbarrel)"或“β-三明治 (β sandwich)"結構，這種折式稱為免疫球蛋白折疊(immunoglobulin folding)。許多膜型和分泌型的蛋白質分子也含有這類*折疊的二級結構，因此，這類分子被統稱為免疫球蛋白超家族(immunoglobulinsuperfamily，IgSF)
抗體分子的水解片段
在一定條件下，Ig分子肽鏈的某些部分易被蛋白酶水解為不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和*(pepsin)是較常用的兩種Ig蛋白水解酶，并可籍此研究Ig的結構和功能，分離和純化特定的12多肽片段。
(一) 木瓜蛋白酶水解片段
木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在鉸鏈區二硫鍵連接的兩條重鏈的近N端，可將Ig裂解為兩個*相同的Fab段和一個Fc段。Fab段即抗原結合片段(fragment antigenbinding，Fab)，由一條完整的輕鏈與重鏈的VH和CHl結構域組成。一個Fab片段為單價，可與抗原結合但不產生凝集反應或沉淀反應；Fc段即可結晶片段(fragment crystallizable，Fc)，由Ig的CH2和CH3結構域組成。Fc段無抗原結合活性，是Ig與效應分子或細胞相互作用的部位。
(二)*水解片段
*作用于鉸鏈區二硫鍵所連接的兩條重鏈的近c端，水解Ig后可獲得一個F(ab’)2片段和一些小片段pFc ’。F(ab’)2是由兩個Fab段及鉸鏈區組成，由于Ig分子的兩個臂仍由二硫鍵連接，因此F(ab’)2片段為雙價，可同時結合兩個抗原表位，與抗原結合可發生凝集反應和沉淀反應。由于F(ab’)2片段既保留了結合相應抗原的生物學活性，又避免了Fc段免疫原性可能引起的副作用，因而被廣泛用于制備生物制品，如*、*均是經*消化后精制提純的生物制品。*水解Ig后所產生的pFc 終被降解，無生物學作用
泛素化多肽序列 - 特異性抗體
