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快速末端平齊化和快速連接試劑盒
#E0542S 20 次反應 . . . . . .￥1,809
#E0542L 100 次反應 . . . . . .￥7,199
特性
30 分鐘內可完成限制性內切酶消化后 DNA 的末端平齊化
即用型預混液在室溫即可進行反應
適用于限制性內切酶消化后的 DNA，已剪切或霧化的 DNA 或 PCR 產物
適用于限制性內切酶消化后的 DNA，已剪切或霧化的 DNA 或 PCR 產物
概述
快速末端平齊化試劑盒將不匹配的 DNA 5′ 或 3′ 突出末端轉變為帶有 5′ 磷酸的平末端，以便有效地與平末端 DNA 克隆載體連接。用 T4 DNA 聚合酶（NEB #M0203）使 DNA 末端平齊化，該酶同時具有 3′ →5′ 外切酶活性和 5′ →3′ 聚合酶活性。酶混合液中的另一成分是 T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201），可將平末端 DNA 的 5′ 端磷酸化，以用于與克隆載體的連接反應。本試劑盒經過優化，可在單次反應中將 5 μg 的 DNA 末端平齊化。
應用
• 對已剪切、霧化、或經限制性內切酶消化的 DNA 進行末端平齊化，便于與質粒、cosmid、fosmid 和 BAC 載體連接
• PCR 產物在進行平末端克隆前進行末端平齊化
• PCR 產物在進行平末端克隆前進行末端平齊化
快速末端平齊化TM試劑盒組份
- 平齊化酶混合液
- 10X 平齊化反應緩沖液
- 1 mM dNTP 混合液
質保聲明
快速末端平齊化試劑盒經過嚴格的質控檢測，確保該產品具有zuigao的活性和純度。
熱失活
70℃ 加熱 10 分鐘。
注意事項
PCR 產物在進行末端平齊化之前必須純化，可采用商業純化試劑盒、酚抽提/乙醇沉淀法或者凝膠電泳的方法純化 DNA。經限制性內切酶消化的 DNA 無需純化可直接進行末端平齊化反應。
