Super Clear Mount(RI:1.52)是將折射率(RI)調(diào)整到與浸油(RI:1.52)以及蓋玻片(RI:1.52)折射率*一致的產(chǎn)品。與傳統(tǒng)封片劑相比,Super Clear Mount提高了深層部位的分辨率,可用于更高分辨率的分析。另外,用油鏡觀察時(shí),即使在深部也可以維持穩(wěn)定的亮度與分辨率(尤其是z分辨率),也可用于超分辨率的應(yīng)用。
數(shù)據(jù)來源:國立研究開發(fā)法人理化學(xué)研究所 柯孟岑老師、今井猛老師(現(xiàn)九州大學(xué)醫(yī)學(xué)研究院)
◆原理/性能表
圖1. Super Clear Mount原理
Super Clear Mount | |
封固后的硬化性 | 非硬化性*、可長期保存(長達(dá)1年) |
折射率 | 1.52 |
適用樣品厚度 | 0~200 μm |
防止熒光蛋白褪色 | +++** |
存儲(chǔ)溫度 | 室溫 |
*Super Clear Mount雖為非硬化性,但與空氣接觸部分會(huì)硬化。因此,可以通過滴入過量的Super Clear Mount,用多余部分硬化蓋玻片、樣本和載玻片。
**與其他市售品比較,+++:好。
◆特點(diǎn)(深層部位的高分辨率、高明亮度)
圖2. 使用Super Clear Mount的深部高分辨率、高明亮度數(shù)據(jù)
(A)使用共聚焦顯微鏡(pinhole size,1 AU)與油浸物鏡(100 ×:NA 1.40;WD 0.13 mm)進(jìn)行熒光微球(diameter, 100 nm)PSF分析。
(B)lateral 以及 axial FWHM(分辨率)數(shù)據(jù)
(A)深層部位可維持高分辨率。
(C)使用羅丹明色素的共聚焦axial scans數(shù)據(jù)
(A)深層部位可維持高分辨率。
◆防止熒光蛋白褪色的效果
在廣泛的頻譜范圍內(nèi)發(fā)揮保持信號(hào)與防褪色效果
圖3. 使用Super Clear Mount的熒光蛋白防褪色效果數(shù)據(jù)
(A)熒光蛋白EGFP光褪色曲線圖
(A)HEK293細(xì)胞中的熒光蛋白表達(dá)后,分別使用Super Clear Mount、PBS、其他公司商品(熒光蛋白適用)封片。
(A)持續(xù)使用水銀燈照射并檢測(cè)熒光亮度變化。物鏡為20× dry(NA 0.4)。將照射開始時(shí)的熒光亮度設(shè)為1。
(B)各熒光蛋白熒光亮度的穩(wěn)定性。
◆使用超分辨率顯微鏡的應(yīng)用實(shí)例
使用超分辨率顯微鏡,實(shí)現(xiàn)深部超分辨率成像
圖4. 使用Super Clear Mount,并用超分辨率顯微鏡觀察
傳統(tǒng)的封片劑會(huì)使畫面失真,但使用Super Clear Mount能在深部獲得高分辨率圖像。
(A)使用超分辨率顯微鏡觀察細(xì)胞膜上的絲狀偽足延伸在HEK293T細(xì)胞的細(xì)胞膜上表達(dá)EGFP后,使用核染料、線粒體染料進(jìn)行觀察通過超分辨顯微鏡獲取細(xì)胞膜上的絲狀偽足延伸。
(B)使用超分辨率顯微鏡觀察果蠅大腦
(A)果蠅大腦延髓神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)細(xì)胞:使用熒光蛋白(GFP)標(biāo)記Mi1,使用超分辨率觀察(深度約為100 μm)。
(A)實(shí)現(xiàn)深層部分超分辨率成像。
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級(jí) |
190-18661 | Super Clear Mount Super Clear Mount封片劑 | 10 mL |