ab9810 | Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) | 100µl | 264 |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品簡介
本品是由辣根過氧化酶(HRP)標(biāo)記的山羊抗兔IgG(H+L),使用抗原偶聯(lián)的瓊脂糖微珠從山羊抗血清內(nèi)親和色譜純化所得。免疫電泳和/或ELISA法檢測顯示本品特異性結(jié)合完整的兔IgG分子,也會與其他兔免疫球蛋白的輕鏈結(jié)合。可能會與其他物種免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng),但不會識別非免疫球蛋白類的血清蛋白。
本品適合做單標(biāo)實驗。要做多標(biāo)(Multiple-labeling)實驗,建議使用經(jīng)過與相近物種血清蛋白或者免疫球蛋白預(yù)先經(jīng)過親和吸附處理的二抗。
推薦使用濃度
ELISA/WB(顯色法) | IHC/ICC | ELISA/WB(化學(xué)發(fā)光法) |
1∶2500 - 1∶50000 | 1∶250 - 1∶2500 | 1∶5000 – 1∶100000 |
產(chǎn)品性質(zhì)
抗體濃度(Antibody Concentration):100µL (0.4 mg/mL)
緩沖液(Buffer):0.005M 磷酸鈉,0.125M 氯化鈉, pH 7.6
穩(wěn)定劑(Stabilizer):7.5mg/mL BSA(無IgG,蛋白酶),50% 甘油
防腐劑(Preservative):None(diedan化鈉會抑制HRP活性)
原料來源(Source of Material):Jackson Immunoresearch 111-035-003
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。 -20℃保存,有效期 1 年。避免反復(fù)凍融。
注意事項
本品不能保存于diedan化鈉中其會抑制辣根過氧化酶(HRP)活性;
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
二抗需要與一抗的同型匹配。
如果一抗為多克隆抗體,由于多克隆抗體主要是IgG類,因此相應(yīng)的二抗應(yīng)該選擇抗IgG抗體;
對于一抗為單克隆抗體的情況,其同型(Isotype)通常會在產(chǎn)品信息中給出,如果你的一抗同型是小鼠IgM(Isotype:IgM),那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)該選擇抗小鼠IgM;
此外,由于抗IgG抗體可以識別大多數(shù)類型的免疫球蛋白,所以,在不清楚一抗同型的情況下,可以選擇抗IgG的二抗;
如果單克隆一抗為小鼠IgG的某一亞類,那么除了選擇抗IgG的二抗外,還可以選擇針對該亞類的二抗,此種抗體在雙標(biāo)記實驗中尤其適合。如一抗同型為小鼠IgG1,那么可以選擇抗IgG二抗或抗IgG1二抗。
3,二抗的特異性
二抗按特異性不同可分為以下幾種:
針對整個抗體分子(H+L)具有特異性:如抗IgG(H+L),此類抗體可以與抗體的各結(jié)構(gòu)組分結(jié)合,且可與其它類免疫球蛋白反應(yīng)(如IgM或IgA),因為所有免疫球蛋白均具有相同的輕鏈(κ或λ);
針對Fab片段具有特異性:這類抗體與重鏈、輕鏈均可結(jié)合,且由于它們可以與輕鏈反應(yīng),所以它們也可以與具有相同輕鏈的其它免疫球蛋白結(jié)合;
針對Fc片段或重鏈具有特異性:這類抗體和重鏈的Fc區(qū)反應(yīng),因此,它們是類別特異性的。比如,γ鏈特異性抗體只與IgG反應(yīng),μ鏈特異性抗體只與IgM反應(yīng);
針對輕鏈具有特異性:與所有類別的抗體反應(yīng);
經(jīng)過預(yù)吸附處理的二抗:不同來源的免疫球蛋白含有相似的結(jié)構(gòu),抗一個物種的抗體可能與其他物種發(fā)生交叉反應(yīng)。經(jīng)過了動物或人類IgG預(yù)吸附處理的二抗,可以減少非特異性的背景。例如,如果是小鼠的組織或細(xì)胞,那么選擇經(jīng)小鼠血清或IgG預(yù)吸附處理的二抗可以減少非特異性結(jié)合。但是此種抗體識別表位的數(shù)量也被大大減少。
4,二抗的形式
整個IgG分子:此種抗體適用于多數(shù)情況;
F(ab’)2片段:該種抗體是由兩個靠二硫鍵連接的Fab片段組成,這些抗體可以避免與細(xì)胞上的Fc受體結(jié)合。
Fab片段:它們只有一個結(jié)合位點,一般用來封閉內(nèi)源性免疫球蛋白。
5,二抗的耦聯(lián)標(biāo)記
一般來講,二抗的耦聯(lián)標(biāo)記主要有酶、熒光基團(tuán)和shengwusu。選用哪種標(biāo)記的二抗主要取決于具體的實驗。
對于western blot和ELISA,zui常用的二抗是酶標(biāo)二抗;
對于細(xì)胞或組織標(biāo)記實驗,例如,免疫熒光、免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)等,通常使用熒光基團(tuán)標(biāo)記的二抗,免疫組化中也可以使用辣根過氧化酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的二抗;
如果想要更大程度的放大檢測信號,可以使用shengwusu/抗生素蛋白(biotin/avidin)檢測系統(tǒng)
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