綠色熒光蛋白（GFP）衍生物被廣泛用作熒光報告基因，以研究細胞和分子水平的生物過程，包括標記細菌。不幸的是，基于GFP的細菌標記是乏味的，并且幾種重要的生物仍然難以修飾熒光蛋白的表達。SYTO-9是細菌基于GFP的熒光標記的補充，已被廣泛用于以更方便的方式（即通過簡單的孵育）標記細菌。但是，據報道，SYTO-9可顯著抑制某些細菌的生長。AAT Bioquest開發了MycoLight™Red JJ94，與SYTO-9相比，對細菌生長的抑制作用zui小。此外，MycoLight™Red JJ94可以與廣泛使用的GFP探針一起用于細菌的多色檢測。它的激發和發射分別在?637和?651 nm處。這與大多數熒光顯微鏡和流式細胞儀通常配備的He-激光激發和Cy5濾光片組完美匹配。MycoLight™Red JJ94是一種遠紅色熒光DNA結合染料，可直接用于活細菌細胞標記，可用于后續的感染研究。它具有較低的固有熒光，但是與DNA結合后，其熒光發射強度會急劇增加。MycoLight™Red JJ94可以輕松染色活細菌而不會損害微生物的生長。在相同條件下，SYTO-9基本上抑制細菌生長，而MycoLight™Red JJ94與液體培養基或固體培養基中的正常細菌*相容。

平臺

• 在不影響正常微生物生長的情況下弄臟活細菌
• 使用Cy5濾光片組和He激光激發，可在大多數流式細胞儀和熒光顯微鏡中廣泛使用
• 可用于細菌中的多色檢測
• 穩定貼標幾個小時

重要   開始實驗之前，請在室溫下解凍組件。

程序

1. 用您選擇的緩沖液稀釋MycoLight ^TM Red JJ94。MycoLight ^TM Red JJ94可以直接添加到細菌培養基中，zui終濃度為2.5 µM。
2. 渦旋混合樣品，然后孵育至少10分鐘。
3. 通過熒光顯微鏡或帶有Cy5過濾器的流式細胞儀監測樣品的熒光信號。

注意：  以上方案可適用于大多數細菌菌株。這些條件需要針對每個菌株和實驗系統進行調整。生長培養基，細胞密度，其他生物的存在和因素可能會影響染色。玻璃器皿上殘留的洗滌劑也可能會影響許多生物的染色，并導致溶液中存在或不存在細胞的情況下，染上鮮艷的物質。注意：  稀釋MycoLightTM Red JJ94時請使用塑料管，因為稀釋的污漬會粘附在玻璃上。通常，在不含磷酸鹽的緩沖液中可獲得*結果。 注意：  可以使用不同的細菌菌株優化染料濃度以獲得*結果。 注意：  自MycoLight ^TMRed JJ94與細菌的生長*兼容，可以將活細菌與MycoLight ^TM Red JJ94長時間孵育。