huangpiaoling是在大多數人體組織和體液中發現的嘌呤堿。huangpiaoling衍生出，包括氨chajian，IBMX，對huangpiaoling，yitongkekejian，kekejian和chajian，它們可以刺激心率，收縮力，高濃度的心律不齊。因此，檢測生物樣品中的huangpiaoling改變對于疾病診斷和治療監測很重要。Amplite™熒光huangpiaoling測定試劑盒提供了一種快速，超靈敏的方法來測定huangpiaoling。可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進行。在huangpiaoling氧化酶存在下，huangpiaoling被氧化為尿酸，釋放出過氧化氫，可以使用熒光酶標儀通過Amplite™Red進行特異性測定。

平臺黃嘌

組件

協議范例

乍看上去

協議摘要

1. 準備huangpiaoling標準品或測試樣品（50 µL）

2. 加入huangpiaoling工作溶液（50 µL）

3. 在室溫下孵育30-60分鐘

4. 在Ex / Em = 540/590 nm時讀取熒光強度

重要說明
開始實驗之前，請在室溫下解凍所有試劑盒組件。

儲備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。避免重復凍融循環。

1. Amplite™Red底物儲備液（250X）：
將40 µL DMSO（組分F）添加到Amplite™Red底物（組分A）小瓶中。注意：Amplite™Red底物在硫醇（如二硫蘇糖醇（DTT））的存在下不穩定。反應中DTT的終濃度應不高于10 µM。該測定應在pH 7-8（建議pH 7.4）下進行，因為Amplite™Red在pH> 8.5時不穩定。

2. HRP儲備溶液（500X）：
將100 µL測定緩沖液（組分B）添加到辣根過氧化物酶（組分C）小瓶中。

3.huangpiaoling氧化酶（XO）儲備溶液（100X）：
將100 µL分析緩沖液（組分B）加入小瓶huangpiaoling氧化酶（E），制成huangpiaoling氧化酶（XO）儲備溶液（100X）。

配制標準溶液

為了方便起見，請使用我們的系列稀釋計

將5 µLhuangpiaoling標準品（組分D）添加到995 µL測定緩沖液（組分B）中，得到100 µMhuangpiaoling標準溶液。取200 µL 100 µMhuangpiaoling標準溶液進行1：3連續稀釋，以得到連續稀釋的huangpiaoling標準液（X1-X7）。

準備工作溶液

將20μLAmplite™Red Substrate儲備液（250X），10μLHRP儲備液（500X）和50μLhuangpiaoling氧化酶儲備液（100X）加入5 mL的測定緩沖液（組分B）中，制成總體積5.08毫升。注意：  避免直接暴露在光線下并立即使用。

程序

表1。huangpiaoling標準品和測試樣品在黑色壁/實心底部96孔微孔板中的布局。X =huangpiaoling標準品（X1-X7，0.137至100 µM）；BL =空白對照；TS =測試樣品。

表2.每個孔的試劑組成。

1. 根據表1和表2提供的布局，準備huangpiaoling標準品（X），空白對照（BL）和測試樣品（TS）。對于384孔板，每孔使用25 µL試劑代替50 µL。
   

2. 在huangpiaoling標準品，空白對照和測試樣品的每個孔中加入50 µLhuangpiaoling工作溶液，使總huangpiaoling測定體積為100 µL /孔。對于384孔板，將25 µL工作溶液加到每個孔中，總體積為50 µL /孔。
   

3. 在避光條件下，室溫下將反應孵育30至60分鐘。
   

4. 使用熒光板讀數器在激發= 530-570 nm（在540 nm處*），發射= 590-600 nm（在590 nm處*），截止= 570 nm處監測熒光的增加。

   13843	Amplite™熒光法huangpiaoling檢測試劑盒	Amplite™ Fluorimetric Xanthine Assay Kit	200 Tests
   13845	Amplite™比色法次氯酸檢測試劑盒	Amplite Colorimetric Hypochlorite (Hypochlorous Acid) Assay Kit	200 Tests