Cell Navigator™血漿膜染色試劑盒可快速,均勻地標(biāo)記質(zhì)膜,而沒有凝集素所表現(xiàn)出的細(xì)胞類型差異。它可以用作HCS(高含量篩選)的分割工具,以及為標(biāo)準(zhǔn)熒光顯微鏡對細(xì)胞質(zhì)膜染色。試劑盒中使用的染色劑可以固定,但不能通透,因此不適用于還涉及通過抗體探測內(nèi)部靶標(biāo)的實驗。
熒光顯微鏡 | |
激發(fā) | TRITC濾波器 |
發(fā)射 | TRITC濾波器 |
推薦板 | 黑墻/透明底 |
成分A:Cellpaint™橙色 | 1個小瓶 |
組分B:測定緩沖液 | 1瓶(50毫升) |
成分C:DMSO | 1小瓶(200 µL) |
- 在生長培養(yǎng)基中準(zhǔn)備細(xì)胞
- 將細(xì)胞與Cellpaint™Orange工作溶液在37ºC下孵育10-20分鐘
- 在熒光顯微鏡下用Ex / Em = 540/590 nm(TRITC濾光片組)分析細(xì)胞
重要說明
開始實驗之前,請在室溫下解凍所有試劑盒組件。
除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣,并在制備后儲存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1. Cellpaint™Orange儲備液(500X):
將100 µL DMSO(組分C)添加到Cellpaint™Orange(組分A)小瓶中,制成500X Cellpaint™Orange儲備液。注意:如果未密封的試管未密封,則未使用的500X Cellpaint™Orange儲備液可在≤-20ºC下保存1個月。避光。
準(zhǔn)備工作溶液
將20 µL 500X Cellpaint™Orange儲備溶液添加到10 mL的測定緩沖液(組分B)中,并充分混合以制成Cellpaint™Orange工作溶液。這種Cellpaint™Orange工作溶液在室溫下至少可穩(wěn)定8小時。避光。 注意: 20 µL 500X Cellpaint™Orange 500X儲備溶液足以用于一個96孔板。
程序
- 在細(xì)胞板中加入100 µL /孔(96孔板)或50 µL /孔(384孔板)的Cellpaint™Orange工作溶液。
- 避光保存,在37°C下孵育細(xì)胞10-20分鐘。注意:細(xì)胞膜探針的*濃度取決于具體應(yīng)用。可以根據(jù)特定的細(xì)胞類型和細(xì)胞或組織對探針的滲透性來改變?nèi)旧珬l件。
- 在每個孔中除去Cellpaint™Orange工作溶液。
- 用生理緩沖液(例如HHBS,PBS或您選擇的緩沖液)洗滌細(xì)胞3次。
- 染色后固定細(xì)胞(可選)。用4%甲醛固定細(xì)胞15-30分鐘。用生理緩沖液洗滌細(xì)胞三遍。
- 使用帶有TRITC濾光片組(Ex / Em = 540/590 nm)的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞中的熒光信號。
22680 Cell Navigator™細(xì)胞膜染色試劑盒*橙色熒光* Cell Navigator™ Cell Plasma Membrane Staining Kit *Orange Fluorescence* 500 Tests 22681 Cell Navigator™細(xì)胞膜染色試劑盒*紅色熒光* Cell Navigator™ Cell Plasma Membrane Staining Kit *Red Fluorescence* 500 Tests