說明收起

Anti-Myc-Tag小鼠單克隆抗體（瓊脂糖偶聯）是與瓊脂糖共價連接的單克隆抗Myc抗體；瓊脂糖可實現Myc標簽蛋白的免疫沉淀（IP）或它們相互作用的伴侶的共免疫沉淀（Co-IP）。

來源收起

通過使用與人c-Myc（EQKLISEEDK）的410-419殘基相對應的合成肽（KLH偶聯）免疫動物，從而生產出這種Abmart單克隆抗體。

特異性收起

Anti-Myc-Tag小鼠單克隆抗體檢測包含Myc表位標簽的轉染蛋白。

倉儲收起

產品以50％漿液的形式在存儲緩沖液（1 PBS，pH 7.4，含0.1％NaN）中提供。將產品存放在4°C且不要凍結。

反應性收起

所有

同種型收起

• 世界銀行

• 

  用Myc標記的蛋白轉染HEK 293T細胞，并將100μl細胞裂解物（約100μg總蛋白）與30μl50％抗Myc瓊脂糖漿在4℃溫育3 h。洗滌后，將小珠用30μl洗脫緩沖液洗脫兩次。中和洗脫液后，添加6μl6x SDS上樣緩沖液。然后將20μl樣品進行SDS-PAGE。用抗Myc標簽小鼠mAb探測印跡。

  泳道1：次用洗脫緩沖液洗脫。

  泳道2：使用洗脫緩沖液進行洗脫。

  
  

推薦的洗脫緩沖液收起

0.2 Mganansuan，pH 2.5

免疫沉淀程序收起

可以在1.5 ml微量離心管或離心柱中進行這項工作。

1.將試管或小瓶顛倒幾次，*重懸抗Myc瓊脂糖。

2.使用寬口移液器吸頭將20-50μl50％的抗Myc瓊脂糖漿添加到細胞裂解物中。

注意：裂解物應該是新鮮的，對于表達良好的標簽蛋白，200μl裂解物（總蛋白200-500μg）通常會產生良好的IP結果。

3.在溫和攪拌下于4°C孵育2小時至過夜。

4.用1 ml TBS緩沖液或裂解緩沖液（例如RIPA（50 mM Tris HCl，pH 7.4，150 mM NaCl，1 mM EDTA，1％NP-40，0.5％鈉）洗滌珠子

脫氧膽酸鹽），以2,000×g離心3分鐘，棄去上清液。

洗滌3次，避免在洗滌過程中丟失珠子。

5.洗脫Myc標記的蛋白。

選項1.用洗脫緩沖液洗脫。

向小珠中加入30-50升洗脫緩沖液，輕輕敲打試管以充分混合，離心3分鐘，非常小心地將上清液轉移至

新鮮的試管（避免轉移任何珠子）。

注意：每20μl洗脫緩沖液中加入1μl1.5M Tris，pH 9.0，立即中和洗脫液。

選項2.用Myc肽洗脫

加入30-50μlMyc肽溶液（在TBS緩沖液中100μg/ ml HA肽），輕輕敲打試管以充分混合，孵育10分鐘，離心3分鐘，

并將上清液轉移到新管中。TBS緩沖液：50 mM Tris HCl，150 mM NaCl，pH 7.4。

選項3.用SDS加載緩沖液洗脫

加入30μl2×SDS上樣緩沖液，輕輕敲打試管以充分混合，在100沸騰5分鐘，離心3分鐘，將上清液轉移至新鮮的

管。

注意：在這種情況下，上清液不僅包含結合蛋白，而且還包含IgG（重鏈和輕鏈）。

6.準備用于蛋白質印跡的SDS-PAGE凝膠或進行其他測定。

配套產品收起

＃M20001 His-Tag（2A8）小鼠單克隆抗體

＃M20002 Myc-Tag（19C2）小鼠單克隆抗體

＃M20003 HA-Tag（26D11）鼠標單克隆抗體

＃M20004 GFP標簽（7G9）小鼠單克隆抗體

＃M20007 GST-Tag（12G8）鼠標單克隆抗體

＃M20008 DYDDDDDK-Tag（3B9）小鼠單克隆抗體（與同一表位綁定

Sigma的Anti-FLAG®M2抗體）

＃M20013抗HA標簽小鼠單克隆抗體（瓊脂糖結合）

＃M20018抗DYKDDDDK標簽小鼠單克隆抗體（瓊脂糖偶聯）（綁定到

與Sigma的Anti-FLAG®M2抗體相同的表位）