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技術(shù)文章

細(xì)胞治療之無血清細(xì)胞凍存

閱讀:365          發(fā)布時間:2019-6-11

      在細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞凍存是關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一,尤其在細(xì)胞治療、細(xì)胞存儲中對細(xì)胞凍存更有特殊要求,下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。

  根據(jù)降溫速度區(qū)分,細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。

  程序降溫凍存技術(shù)要點是慢凍,標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2/℃ min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時,可增至-5 ℃~-10℃/min。之前,常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4 ℃30分鐘--->-20 ℃ 60分鐘--->-80 ℃過夜--->液氮罐。不過,由于步驟較多,間隔時間又長,很容易遺忘。之后,人們也開始使用程序降溫盒。將凍存管放入程序降溫盒中,再將程序降溫盒放入-80 ℃冰箱。以1 ℃/min的速度進(jìn)行降溫。

  快速凍存即不需要經(jīng)過梯度降溫,直接將細(xì)胞放入-80 ℃冰箱24h,后轉(zhuǎn)入液氮長期凍存。快速凍存簡化了凍存步驟,同時不需要使用梯度凍存盒。

  不同的凍存方法代表了不同的凍存體系,程序降溫法使用的凍存液主要配方為培養(yǎng)基、血清、DMSO。血清大多采用牛源,同時血清中未知成分和病毒等感染物質(zhì)會給凍存帶來影響與風(fēng)險,該方法科研上廣泛使用,并延續(xù)至今,但是顯然已經(jīng)不能適應(yīng)現(xiàn)今細(xì)胞治療的應(yīng)用場景。

  隨著細(xì)胞治療以及細(xì)胞儲存產(chǎn)業(yè)發(fā)展,細(xì)胞凍存也面臨從科研應(yīng)用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。凍存要求發(fā)生改變,因為凍存細(xì)胞要進(jìn)行臨床應(yīng)用,所以凍存液成分由原來血清變?yōu)闊o血清,無動物源成分,凍存液中使用的所有原料均應(yīng)符合臨床或藥物需求。隨著細(xì)胞凍存數(shù)量增加,凍存流程簡化也成為必然趨勢,因此無血清非程序降溫凍存液應(yīng)運而生。

  目前針對細(xì)胞治療領(lǐng)域,AppliedCell推出一款即用型的無血清細(xì)胞凍存液,這款產(chǎn)品是細(xì)胞凍存研究的革新,主要具有幾大特點,凍存液無血清成分、無需配制直接使用、無需程序降溫盒、不需分步降溫、即用型細(xì)胞凍存液。該款凍存液適用于臍帶、脂肪、骨髓等間充質(zhì)干細(xì)胞,免疫細(xì)胞以及大多數(shù)細(xì)胞系凍存。同時該款所有成分均使用藥用級原料配制而成,*適應(yīng)細(xì)胞儲存,細(xì)胞治療以及科學(xué)研究等不同場景使用。

  

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