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南京億迅生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 質(zhì)控樣品,人工血清,人工胃液,elisa試劑盒,化學(xué)試劑,生物試劑 |
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| 參考價 | ￥ 260 |
| 訂貨量 | 5支 |
- 型號
- 品牌
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
- 所在地 南京市
更新時間：2021-07-06 13:32:31瀏覽次數(shù)：761
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HRP標(biāo)記的兔抗牛IgM
本產(chǎn)品僅用于研究用途，不用于人類、治療或診斷應(yīng)用。
| 抗體來源 | Rabbit |
| 克隆類型 | Polyclonal |
| 交叉反應(yīng) | cow |
| 產(chǎn)品應(yīng)用 | WB=1:1000-10000 ELISA=1:1000-10000 IHC-P=1:100-1000 IHC-F=1:100-1000 not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user. |
| 分 子 量 | 900kDa |
| 性 狀 | Lyophilized or Liquid |
| 濃 度 | 2mg/1ml |
| 免 疫 原 | Full length plasma protein: |
| 亞 型 | IgG |
| 純化方法 | affinity purified by Protein A |
| 儲 存 液 | 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol. |
| 保存條件 | Storage: Store at –20 oC for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20oC. When reconstituted in sterile distilled water or diluent supplied, theantibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. |
HRP標(biāo)記的兔抗牛IgM
抗體可以通過不同的化學(xué)試劑交聯(lián)到酶（辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、β-半乳糖苷酶）、熒光染料（FITC、PE、APC等）、生物素（Biotin）、膠體金等。抗體標(biāo)記HRP為經(jīng)典的方法為NaIO4氧化法，先將HRP糖基氧化成醛基，醛基與抗體的-NH2反應(yīng)生成希夫氏堿反應(yīng)，抗體分子與HRP分子形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。標(biāo)記的時候一般按照抗體分子與HRP分子摩爾比1:4的比例進行標(biāo)記，此時,兩者的質(zhì)量約為1:1。
1. 抗體/蛋白的HRP標(biāo)記（NaIO4氧化法）
標(biāo)記以2mg抗體為例。
1.1 抗體/蛋白的處理
待標(biāo)記抗體/蛋白在50mM碳酸鹽緩沖液 (0.015M Na2CO3，0.035M NaHCO3，pH9.6) 中透析，其間換液2次，抗體/蛋白濃度調(diào)整為2mg/ml；或者將高濃度的抗體用0.5M碳酸鹽緩沖液(0.15M Na2CO3,0.35M NaHCO3 ,pH9.6)稀釋到2mg/ml，如果原抗體/蛋白溶液中含有Tris、NH4+等游離氨基的試劑，必須透析除去。
1.2 HRP酶的氧化
1.2.1 稱取2mg HRP干粉(Frdbio)溶于100 μL ddH2O 中。
1.2.2 稱取 NaIO4 21mg，溶于1 mL的ddH2O中，吸取100μL NaIO4溶液與100μL的HRP溶液緩慢混合，4℃下靜置 30min，此時溶液為綠色。
（注意：此后的操作均在避光條件下進行。）
1.2.3 吸取２µL乙二醇緩慢加入氧化后的HRP溶液，室溫避光靜置 30min，此時溶液為褐色。
1.3 抗體的標(biāo)記
1.3.1 將氧化好的HRP溶液直接加入到已處理好的抗體/蛋白溶液中，室溫反應(yīng)２h。
1.3.2 稱取0.4mg的NaBH4，溶解于20µL的 ddH2O中，全部加入上步反應(yīng)液中，4℃靜置 2h，每30min搖動一次。
1.3.3 PBS(pH7.2)透析過夜，標(biāo)記液中加入體積比30%～50%的甘油，混勻后置于-20℃保存。
2. 抗體/蛋白的HRP標(biāo)記（戊二醛法）
