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南京億迅生物科技有限公司
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更新時間：2019-11-07 13:38:42瀏覽次數(shù)：476
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谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)檢測試劑盒
測定意義：
GST是一種具有多種生理功能的蛋白質(zhì)家族，主要存在于細胞質(zhì)內(nèi)。GST是體內(nèi)解毒酶系統(tǒng)的重要組成部分，主要催化各種化學物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物與GSH的巰基共價結(jié)合，使親電化合物變?yōu)橛H水物質(zhì)，易于從膽汁或尿液中排泄，達到將體內(nèi)各種潛在或具備毒性的物質(zhì)降解并排出體外的目的。因此，GST在保護細胞免受親電子化合物的損傷中發(fā)揮著重要的生物學功能。此外，因為GST具有GSH-Px活性，亦稱為non-Se GSH-Px，具有修復氧化破壞的大分子如DNA、蛋白質(zhì)等的功能。注意，GST催化的反應減少GSH含量，但是不增加GSSG含量。
自備儀器和用品：
低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、紫外-可見分光光度計/、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
試劑組成和配置：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加2 mL蒸餾水溶解。
粗酶液提取：
稱約0.1g樣品，加入1 mL試劑一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清液待測。
測定：
1. 分光光度計預熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長到340 nm，用蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三放在25℃（一般物種）或者37℃（哺乳動物）保溫。
3. 空白管：取微量石英比色皿或96孔板，加入20μL試劑一，180μL試劑二和20μL試劑三，迅速混勻后于340nm測定吸光度變化，記錄10 s和310 s吸光度為A1和A2。
4. 測定管：取微量石英比色皿或96孔板，加入20μL上清液，180μL試劑二和20μL試劑三，迅速混勻后于340nm測定吸光度變化，記錄10 s和310 s吸光度為A3和A4。
谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)檢測試劑盒
