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上海雅吉生物科技有限公司

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人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)Elisa試劑盒
人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)Elisa試劑盒
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更新時間:2019-07-10 15:07:38瀏覽次數:294

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【簡單介紹】
人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)Elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度

人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)Elisa試劑盒性能
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:低檢測濃度小于0.1 ng/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個月

樣品收集、處理及保存方法:
1、血清:用無菌管收集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2、血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3、尿液:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
4、胸腹水:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5、腦脊液:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。((采集大鼠腦脊液)的方法:采集腦脊液時,用濕紗布擦試大鼠頸背部皮膚,剪去背毛暴露皮膚。兩耳連線剪一橫切口((1. 5cm左右),在其中點向尾側沿皮下剪開2cm,將皮分離兩側,擴大視野。緊貼大鼠頭骨依次逐層剪切各肌層,并斷端依次拉向尾側擴大視野。注意,有出血時用干紗布按壓止血,保持術口清晰。接近頸后黃韌帶時,小心地用7號注射針頭分離附蓋的肌肉,暴露寰枕膜。用lml注射器(針頭用止血鉗使針尖與針體成150度鈍角),針斜面向上,針*近水平刺入蛛網膜下腔,固定針體,緩慢抽取腦脊液,一般采集量為100-200微升。)
6、唾液:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
7、細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
8、牛奶:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
9、蜂蜜:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
10、全血:用含有抗凝劑的無菌管收集,立即輕輕搖動,來回輕輕顛倒數次,使血液和抗凝劑混勻,以防血液凝固。
11、 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)Elisa試劑盒操作方法
1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
?3.  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。



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