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上海雅吉生物科技有限公司
主營產品： 培養原代細胞,細胞系價格,耐藥細胞株,實時熒光pcr試劑盒 |
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| 參考價 | ￥ 1800 |
| 訂貨量 | 1 |
- 型號
- 品牌
- 廠商性質 生產商
- 所在地 上海市
更新時間：2019-05-21 09:56:09瀏覽次數：376
聯系我們時請說明是環保在線上看到的信息，謝謝!
產品規格：1*10^6個細胞/T25
凍存條件:無血清細胞凍存液
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。
溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%
傳代方法 1:2~1:4傳代
傳代情況： 2天換液
OKT3總T淋巴細胞描述：收集瓶子中培養基留作過渡培養細胞鋪板是細胞實驗中常見又必須掌握的一門技術，看似簡單，然而卻經常遇到如細胞居中或者中間稀疏等不均勻分布的現象，結果就是只能整板扔掉，重新鋪板，既耽擱時間又浪費了細胞及培養板等資源。歷經多次失敗后，你才會發現，原來細胞鋪板是有規律可循的，今天我們就聊一聊：細胞鋪板的3種手法。
首先，我們來看看細胞鋪板不均勻的3種常見情況：
1，中間多，周圍少
2，中間少，四周多
3，呈現一坨一坨的狀態
這么多種不均勻的情況，到底該怎么拯救呢？一起來看看細胞鋪板的三種手法：
手法一：均勻單層
要鋪成那種很均勻的單層細胞，手法如下：
1，細胞板子先加入一定量(一般是總量培養基的1/5)的培養基，放入孵箱中放置10-20min。
2，在滴入細胞時，細胞板子與通風櫥有一定的角度，沿著板壁的孔邊緣滴入。
3，滴入后，呈“8”字方法搖晃5-8次。
4，置于水平臺上，放置10-20分鐘
5，放入孵箱。
在細胞鋪板時，每一種板子的孔面積有多大，培養的液體量以及加入細胞量如下：
手法二：中間少，周圍多
其實細胞鋪板不一定都需要單個單個的那么均勻，比如，做免疫熒光時，學霸姐姐喜歡鋪中間少，周圍稍多的板子，
因為這個樣子可以同時檢測到單個細胞的形態，另外又可以照一點低倍的用作于統計，所有的細胞都在一個環境中。
特別說明一下：這里的多也只是相對于多，細胞也是單層的。
中間
周圍
要鋪這樣的細胞樣子，那鋪細胞時要注意手法了：
1，細胞板子不需要提前用培養基潤洗，直接從邊上滴入混有細胞的培養基。
2，放置30s-1min后，前后搖晃5-8次。
3，放在水平臺上靜置2-5min。
4，放入孵箱。
手法三：中間多，周圍少
學一般在提取蛋白或者提取RNA的時候，可以這樣鋪板，因為有些細胞刮刀不好用，沒有辦法刮到周圍的。想要鋪中間多，周圍少的板子，手法如下：
1，細胞板子不需要提前潤洗，從中間滴入進去后。
2，把板子朝一個方向順時針或者逆時針旋轉3-5圈。
3，水平臺上靜置2-5min。
4，放入孵箱。
總結一下：想要細胞鋪板鋪得好，背景知識很重要
其實在鋪細胞的時候，你要準確的知道你所養的細胞的特性，比如：
1，細胞的名稱，來源。
2，細胞的屬性。
3，細胞分裂時間。
還有，主要的是要搞清楚你的細胞的生長曲線，還要知道鋪板后多久可以到達什么細胞密度。
如果你準確的掌握了你的細胞特性，那鋪板是分分鐘搞定的事情。
細胞鋪板后，細胞狀態不好怎么辦？
如果出現這種情況，學霸姐姐建議你從以下幾個方面考慮一下原因：
1，用來鋪板的細胞狀態本身就不好。
2，用來鋪板的細胞傳代次數太多，有些老化。
3，胰酶消化時間過長。
4，中和的血清量及時間不夠。
5，支原體污染。
OKT3總T淋巴細胞鋪板是一個經驗積累的過程，你的手法也需要積極的改進，不要生搬硬套，也不要一味追求的鋪均勻，在實驗過程中多思考細胞本身的特征和屬性，出現問題積極解決即可。
