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產品名稱:OCI-LY3彌漫大B細胞淋巴瘤細胞

產品規格：1*10^6個細胞/T25
凍存條件:無血清細胞凍存液
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。
溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%
傳代方法 1:2~1:4傳代
傳代情況： 2天換液
細胞描述：收集瓶子中培養基留作過渡培養

細胞株的交叉污染和錯誤辨識已為生物醫學基礎研究和產業發展帶來研究結論錯誤、結果不可重復、雜志撤稿、臨床細胞治療失敗等重大危害。因此NIH等機構已經將細胞鑒定作為基金申請的前提條件，而Science、Nature、Cell等著名期刊也明確要求必須對投稿文章中所用的人源細胞做身份鑒定。
   
     STR（Short Tandem Repeat，短串聯重復序列）是一類廣泛存在于真核生物基因組中的DNA串聯重復序列，由于其核心序列重復次數存在個體差異多態性，因此STR也被稱為細胞的DNA指紋。2011年美國頒布了細胞STR鑒定國家標準（ANSI/ATCC ASN-0002-2011）。目前STR檢測已被廣泛應用于親子鑒定、個體識別、細胞來源判定等方面。ATCC、DSMZ、JCRB等細胞庫已將STR基因分型列為細胞鑒定的金標準。
一、細胞培養條件：電詢
二、細胞收到后處理
在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的好辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的*培養液收集至離心管中，加入6ml*培養基，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。（注意發貨的是密封培養瓶的話，放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松）

三、細胞培養步驟

復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL*培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞傳代：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的*培養基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右*培養基混勻，放入培養箱過夜培養后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

售后服務告知書

一、收到細胞處理方法

1. 收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置若干小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態，100×，200×各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行售后的依據。

2. 收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費重發一次細胞。

3. 由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素的影響，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態，故客戶需要售后是需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后與客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。

4. 如客戶對細胞的種類、純度、活性等特性有疑問，需提供相應的生物學實驗檢測結果作為依據。

細胞出現問題，可重發的情況有哪些？判定標準是什么？
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、瓶身破損、培養液嚴重漏液等，重發；

2. 細胞污染問題，請在收到產品48小時內，給我們提出真實的實驗結果，核實后重發；

3. 常溫發貨的細胞靜置24小時后，干冰凍存發貨的細胞復蘇后24小時后，絕大多數細胞未存活，（需提供真實清晰的細胞狀態照片），重發；

4. 干冰凍存發貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發貨的細胞靜置4小時候并且未開封，出現污染，重發；

5. 細胞活性問題，請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，核實后予重發；

6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照，3天未告知的，視為產品合格。4-7天內出現問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的，并跟技術人員溝通的，由技術人員判定為我方責任的，重發。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協商處理或者按合同價的50%收費重發。

注意：若對細胞鑒定存在爭議，可以在收到細胞3個月內提供真實有效的STR檢測證明，本公司承諾無條件退還細胞款項，其他情況本公司將不予受理。

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