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上海宇淳生物科技有限公司

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土壤硝酸還原酶(S-NR)試劑盒,微板法
土壤硝酸還原酶(S-NR)試劑盒,微板法
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48T1050元1 盒 可售

更新時間:2024-06-06 10:54:49瀏覽次數:331

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【簡單介紹】
級別 其他
土壤硝酸還原酶(S-NR)試劑盒,微板法
土壤硝酸還原酶可以把土壤中的硝酸鹽轉變為亞硝酸鹽,然后再通過亞硝酸還原酶的作用 轉變成氮循環的重要原料-銨,從而調節氮代謝

土壤硝酸還原酶(S-NR)試劑盒,微板法

土壤硝酸還原酶(S-NR)試劑盒,微板法

本試劑盒僅供科研使用 1 土壤硝酸還原酶(Solid-Nitrate ReductaseS-NR)試劑盒說明書 (貨號:WS9030W 微板法 48 ) 一、產品簡介: 土壤硝酸還原酶可以把土壤中的硝酸鹽轉變為亞硝酸鹽,然后再通過亞硝酸還原酶的作用 轉變成氮循環的重要原料-銨,從而調節氮代謝,并影響到光合碳代謝,進而影響植物生長。 本試劑盒提供一種快速、精確的測定方法,土壤硝酸還原酶催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽; 同時抑制亞硝酸還原酶對產生的亞硝酸鹽的降解,亞硝酸鹽與對應的顯色劑反應生成(粉) 紅色偶氮化合物;該有色物質在 540nm 有吸收峰,進而得出土壤硝酸還原酶的活性。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規格試劑名稱 保存要求 備注 試劑一 液體 25mL×1 4℃保存 試劑二 液體 6mL×1 4℃保存 試劑三 液體 60mL×1 4℃保存 試劑四 液體 7mL×1 4℃保存 試劑五 A 6mL×1 4℃保存 臨用前,可依據待檢測樣本數量, A液和B液等比例混合成無色反應 mix(注意觀察,若變粉色, 則不能使用)。 兩天之內用完。 B 6mL×1 標準品 粉體 mg×1 4℃保存 若重新做標曲,則用到該試劑 三、所需的儀器和用品: 酶標儀、96 孔板、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、蒸餾水。 四、土壤硝酸還原酶(S-NR)的測定: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗 樣本和試劑浪費! 1、樣本制備 取新鮮土樣風干或者 37 度烘箱風干,先粗研磨,過 40 目篩網,備用。 【注】:土壤風干,減少土壤中水分對于實驗的干擾;土壤過篩,保證取樣的均勻細膩; 2、測定步驟 ① 酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 540nm② 在 1mLEP 管中依次加入: 試劑名稱(μL測定管 對照管 土樣(g0.25 0.25 試劑一 200 200 試劑二 50 50 蒸餾水 250 250 混勻,且務*用封口膜封 口。25℃培養 24h 混勻,且務*用封口膜封口。-20℃培 24h(可放在-20℃冰箱) 試劑三 500 500 混勻,12000rpm4℃離心 10min,上清液待用本試劑盒僅供科研使用 2 ③ 顯色反應,在 96 孔板中依次加入: 上清液 40 40 試劑四 60 60 反應 mix 100 100 混勻,25℃反應 5min(準確時間),立即540nm 處讀取 A 值, A=A 測定-A 對照(每個樣本做一個自身對照管)。 【注】:若A 值低于 0.01,可增加③ 步中上清液的體積(如由 40μL 增至 100μL,則試劑四減至 0μL保持總體積仍為 200μL)。 五、結果計算: 1、標準曲線方程:y =3.9669x - 0.0037x 為標準品濃度(μmoL/mL),y 為吸光值A2、單位定義:每天每克土樣中產生 1μmoL NO2 ˉ的量為一個酶活力單位。 S-NR(μmoL/d/g 土樣)=[(A+0.0037)÷3.9669×V1]÷W÷T =0.252×(A+0.0037)÷W 3、單位定義:每天每克土樣中產生 1μg NO2 ˉ的量為一個酶活力單位。 S-NR(μg/d/g 土樣)=[(A+0.0037)÷3.9669×V1]÷W÷T×46 =11.6×(A+0.0037)÷W V1---反應體系總體積,1mLT---反應時間,24h=1dW---樣本實際質量,g標準品的分子量---69NO2 -的分子量---46附:標準曲線制作過程: 1 制備標準品母液(100μmol/mL):把標準品*全溶解于 1mL 蒸餾水中(母液需在兩 天內用且-20℃保存)。 2 把母液用蒸餾水稀釋成六個濃度梯度標準品:0, 0.04, 0.08, 0.12, 0.16, 0.2. μmol/mL也可根據實際樣本來調整標準品濃度。 3 依據顯色反應階段的測定管的加樣順序操作,根據結果即可制作標準曲線。



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