| 上海宇淳生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： PCR八聯(lián)排管,sigma現(xiàn)貨,Cy7試劑 |
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| 參考價(jià) | ￥570 |
-
型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 24T | 570元 | 1 盒 可售 |
更新時(shí)間：2024-05-31 10:21:31瀏覽次數(shù)：256
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土壤植酸酶(S-Phytase)試劑盒
土壤植酸酶(S-Phytase)試劑盒
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤植酸酶（phytase）試劑盒說(shuō)明書 （貨號(hào)：WS7330F 分光法 24 樣） 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 植酸酶（phytase，EC.3.1.3.8）是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸（鹽）的一類酶 的總稱，屬磷酸單酯水解酶，能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效 磷，降低糞便中的磷含量，減輕對(duì)環(huán)境的污染，改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用，因此具有極 其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。 土壤植酸酶在一定溫度和 pH 值條件下，水解底物植酸鈉生成無(wú)機(jī)磷與肌醇衍生物，無(wú) 機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物，通過(guò)在 700nm 處檢測(cè)該有色物質(zhì)的生 成速率即可計(jì)算植酸酶活性大小。 二、試劑盒組成和配制： 試劑名稱 規(guī)格試劑名稱 保存要求 備注 試劑一 液體 60mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 粉劑 mg×1 瓶 4℃保存 臨用前甩幾下使試劑落入底部，再 加入 30mL 試劑一，充分溶解備 用， 試劑三 液體 20mL×1 瓶 4℃保存 試劑四 粉劑 mg×1 瓶 4℃保存 臨用前甩幾下使試劑落入底部，再 加入 24mL 蒸餾水，充分溶解備 用。 試劑五 粉劑 mg×1 瓶 4℃保存 臨用前甩幾下使試劑落入底部，再 加入 6mL 蒸餾水，充分溶解備用。 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑 mg×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑。 反應(yīng) mix 的制備（現(xiàn)配現(xiàn)用）：試劑四：五按照 4:1 的比例混合，可根據(jù)樣本數(shù)量配制需要量， 若一次性用完，可把試劑五一次性全部倒入試劑四中，混合備用。 三、所需的儀器和用品： 可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋，可 調(diào)式移液器。 四、土壤植酸酶活性測(cè)定： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣本情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備： 取新鮮土樣風(fēng)干或者 30℃烘箱風(fēng)干，先粗研磨，過(guò) 40 目篩備用。 【注】：土壤風(fēng)干，減少土壤中水分對(duì)于實(shí)驗(yàn)的干擾；土壤過(guò)篩，保證取樣的均勻細(xì)膩； 2、上機(jī)檢測(cè)： ① 可見分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 700nm，蒸餾水調(diào)零。 ② 在 EP 管中依次加入： 試劑名稱（μL） 測(cè)定管 對(duì)照管 土壤 0.2g 0.2g 試劑一 1000 試劑二 1000本試劑盒僅供科研使用 2 混勻，37℃振蕩培養(yǎng) 1 小時(shí) 試劑三 200 200 混勻，室溫條件下 10000rpm，離心 5min。上清液待測(cè)。 ③ 顯色反應(yīng)，在 EP 管中依次加入： 上清液 300 300 試劑三 150 150 反應(yīng) mix 450 450 混勻，室溫（25℃）靜置 15min，全部液體轉(zhuǎn)移至 1mL 玻璃比色皿中，于 700nm 處讀取吸光值 A，△A=A 測(cè)定 -A 對(duì)照（每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管）。 【注】1. 顯色反應(yīng)階段靜置后出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，靜置結(jié)束后可先于室溫 10000rpm，離心 5min 后， 再取全部上清液至 1mL 玻璃比色皿中。 2. 若△A 值在零附近徘徊，可在 37℃孵育階段延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間 T(如增至 3h 或更長(zhǎng))，或增加 土壤樣本量 W（如增至 0.3g），則改變后的反應(yīng)時(shí)間 T 和 W 需代入計(jì)算公式重新計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y = 0.587x + 0.004，x 是標(biāo)準(zhǔn)品摩爾濃度（μmoL/mL）, y 是△A。 2、酶活定義：37℃條件下，pH5.5 的條件下，每克土樣每小時(shí)釋放出 1μmol 的無(wú)機(jī)磷為 一個(gè)酶活力單位。 土壤植酸酶活性(μmol/h/g 土樣)=(△A-0.004)÷0.587×V1÷W÷T =2.05×(△A-0.004)÷W V1---孵育階段的反應(yīng)總體積，1.2mL； T---反應(yīng)時(shí)間，1h； W---樣本質(zhì)量，g； 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（5μmoL/mL）：標(biāo)準(zhǔn)品用 10mL 試劑一溶解。（母液需在兩天內(nèi)用）。 2 把母液用試劑一稀釋成六個(gè)濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 0.6, 1.2, 1.8, 2.4, 3. μmoL/mL。也 可根據(jù)實(shí)際樣本來(lái)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 依據(jù)顯色反應(yīng)階段測(cè)定管的加樣體系操作，根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
