| 上海宇淳生物科技有限公司
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| 參考價 | ￥230 |
-
型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質
經銷商 -
所在地
上海市
| 96T | 230元 | 1 盒 可售 |
更新時間：2024-05-30 10:54:20瀏覽次數：327
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鈣含量檢測試劑盒,微板法
鈣含量檢測試劑盒,微板法
本試劑盒僅供科研使用 1 鈣含量（鄰甲*酞絡合銅比色法）檢測試劑盒說明書 （貨號：WS8121W 微板法 96 樣） 一、產品簡介： 鈣(Calcium)是一種金屬元素，常溫下呈銀白色晶體，動物的骨骼、蛤殼、蛋殼都含 有碳酸鈣。檢測生命體鈣含量，主要通過檢測鈣離子濃度實現的。 本試劑盒利用溶液中鈣離子在堿性條件下能與鄰甲酚*絡合銅(OCPC)結合，生成紫 紅色的絡合物，加入鎂離子螯合劑，去除鎂離子背景干擾。通過檢測生成有色絡合物于 575nm 處的吸光值，即可計算出總鈣含量。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規格 保存要求 備注 試劑一 液體 11mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 液體 11mL×1 瓶 4℃保存 標準品 液體 1mL×1 支 4℃保存 2.5mmol/L 的鈣標準品。 三、所需儀器和用品： 酶標儀、96 孔板、可調式移液器、離心機、蒸餾水（無鈣離子）。 四、鈣含量檢測： 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗 樣本和試劑浪費！ 1、 樣本制備： ① 液體樣品：澄清的液體樣本如血清可直接檢測。 ② 組織樣本：取約 0.1g 組織樣本，加 1mL 生理鹽水研磨，粗提液全部轉移到 EP 管中， 12000rpm，常溫離心 10min，上清液待測。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取。 ③ 細菌/細胞樣本：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或 細胞加入 1mL 生理鹽水，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間 隔 10s，重復 30 次）；12000rpm 離心 10min，取上清待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（104）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 2、上機檢測： ① 酶標儀預熱 30min，設定波長到 575nm。 ② 所有試劑解凍至室溫，按照試劑一：試劑二為 1:1 配制反應 mix（4℃避光保存三天）。 ③ 在 96 孔板中依次加入： 試劑名稱（μL） 測定管 標準管 （僅測一次） 空白管 （僅測一次） 樣本 5 標準品 5 蒸餾水 5 反應 mix 200 200 200本試劑盒僅供科研使用 2 【注】：1. 測定管的 A 值若超過 1，可把樣本用蒸餾水稀釋后測定，稀釋倍數 D 代入計算公式。 2. 若 A 測定值接近 A 空白值，則可以增加樣本加樣體積 V1（如增至 25μL，則反應 mix 減 為 180μL；標準管仍為 5μL，蒸餾水 20μL，反應 mix 為 180μL；空白管為蒸餾水 25μL， 反應 mix 為 180μL），則改變后的 V1 需帶入公式計算。 五、結果計算： 1.按液體體積計算： 鈣含量(mmol/L)=(C 標準×V 標)×(A 測定-A 空白)÷(A 標準-A 空白)÷V1×D =2.5×(A 測定-A 空白)÷(A 標準-A 空白)×D 2.按樣本質量計算： 鈣含量(μmol/g)=(C 標準×V 標)×(A 測定-A 空白)÷(A 標準-A 空白)÷(W×V1÷V)×D =2.5×(A 測定-A 空白)÷(A 標準-A 空白)÷W×D 3、按細胞數量計算： 鈣含量(nmol/104 cell)=(C 標準×V 標) ×103×(A 測定-A 空白)÷(A 標準-A 空白)÷(500×V1÷V)×D =5×(ΔA 測定-ΔA 空白)÷(ΔA 標準-ΔA 空白)×D C 標準---鈣標品濃度，2.5mmol/L=2.5μmol/mL； V 標---標準品加入體積，0.005mL； D---稀釋倍數，未稀釋即為 1； V1---加入樣本體積，0.005mL； V---提取液體積，1mL； W---取樣質量，g； 500---細胞數量，萬。 混勻，室溫放置 2min，于波長 575nm 處讀取各管吸光度 A。
