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尿酸(UA)含量試劑盒(尿酸酶比色法)
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更新時間:2024-05-28 15:24:02瀏覽次數:334

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【簡單介紹】
級別 其他
尿酸(UA)含量試劑盒(尿酸酶比色法)
尿酸是嘌呤代謝的最終產物,并通過腎臟過濾排泄到尿液中。許多腎臟疾病會影響尿 酸水平,所以尿酸測定在診斷和評估腎臟疾病中具有重要作用。

尿酸(UA)含量試劑盒(尿酸酶比色法)

尿酸(UA)含量試劑盒(尿酸酶比色法)

本試劑盒僅供科研使用 1 尿酸含量(尿酸酶法)檢測試劑盒說明書 (貨號:WS2021F 分光法 48 樣) 一、產品簡介: 尿酸是嘌呤代謝的最終產物,并通過腎臟過濾排泄到尿液中。許多腎臟疾病會影響尿 酸水平,所以尿酸測定在診斷和評估腎臟疾病中具有重要作用。 本試劑盒利用尿酸酶特異作用于尿酸,氧化產生的產物與顯色劑反應呈現的(粉)紅 色,該有色物質在520nm有吸收峰,進而計算得到尿酸含量。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規格 保存要求 備注 提取液 液體 60mL×1 4℃保存 試劑一 液體 25mL×1 4℃保存 試劑二 液體 15mL×1 4℃保存 試劑三 粉體 mg×1 -20℃保存 臨用前甩幾下使粉體落入底部,再 1.2mL 的試劑一溶解備用。 標準管 粉體 mg×1 4℃保存 臨用前加 2mL 試劑一超聲*全溶 解,即 0.2mg/mL 尿酸溶液,再用 蒸餾水稀釋2倍即0.1mg/mL備用。 三、所需儀器和用品: 可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、可調式移液器、離心機、蒸餾水。 四、尿酸含量檢測: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實 驗樣本和試劑浪費! 1、樣本制備: ① 液體樣品: 澄清的液體可直接檢測;若渾濁則離心后取上清液檢測。 ② 組織樣本: 取約 0.1g 組織樣本,加 1mL 的提取液研磨,粗提液全部轉移到 EP 管中,12000rpm, 常溫離心 10min,上清液待測。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取。 ③ 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(104):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。本試劑盒僅供科研使用 2 2、上機檢測: ① 可見分光光度計預熱 30min,設定波長到 520nm,蒸餾水調零。 ② 做實驗前選取 2 個樣本,找出適合本次檢測樣本的稀釋倍數 D。 ③ 所有試劑解凍至室溫,在 1mL 玻璃比色皿中依次加入: 【注】:1.測定管的 A 值若超過 1.5,可把樣本再進行稀釋,稀釋倍數 D 代入計算公式。 2. A 的差值在零附近徘徊,可增加樣本加樣量 V1(如增至 100μL,則試劑一相應減少, 保持總體積不變),則改變后的 V1 需代入公式重新計算。 五、結果計算: 1、按液體體積計算: 尿酸含量(mg/mL)= (C 標準×V )×(ΔA 測定-ΔA 空白)÷(ΔA 標準-ΔA 空白)÷V1×D =0.1×(ΔA 測定-ΔA 空白)÷(ΔA 標準-ΔA 空白)×D 尿酸含量(μmol/L)= (C 標準×V )×(ΔA 測定-ΔA 空白)÷(ΔA 標準-ΔA 空白)÷V1×D×106÷Mr =0.1×106÷Mr×(ΔA 測定-ΔA 空白)÷(ΔA 標準-ΔA 空白)×D 2、按樣本鮮重計算: 尿酸含量(mg/g)=(C 標準×V )×(ΔA 測定-ΔA 空白)÷(ΔA 標準-ΔA 空白)÷(W×V1÷V)×D =0.1×(ΔA 測定-ΔA 空白)÷(ΔA 標準-ΔA 空白)÷W×D 3、按細胞數量計算: 尿酸含量(μg/104 cell)=(C 標準×V ) ×103×(ΔA 測定-ΔA 空白)÷(ΔA 標準-ΔA 空白)÷(500×V1÷V)×D =0.2×(ΔA 測定-ΔA 空白)÷(ΔA 標準-ΔA 空白)×D C 標準---尿酸標品濃度,0.1mg/mL; D---稀釋倍數,未稀釋即為 1; V ---加入樣本體積,0.04mL; V1---加入樣本體積,0.04mL; V---提取液體積,1mL; W---取樣質量,g500---細胞數量,萬; Mr---尿酸分子量,168.1。 試劑名稱(μL測定管 空白管 (僅做一次) 標準管 僅做一次) 樣本 40 蒸餾水 40 標準品 40 試劑一 440 440 440 試劑二 300 300 300 混勻,37℃避光孵育 5min,于 520nm 處讀取吸光值 A1。 試劑三 20 20 20 混勻,37℃避光反應 10min,于 520nm 處讀取吸光值 A2(直到 A2 值不變),ΔA =A2-A1。



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