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上海宇淳生物科技有限公司

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植物硝態(tài)氮/硝酸鹽含量試劑盒,微板法
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【簡單介紹】
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植物硝態(tài)氮/硝酸鹽含量試劑盒,微板法
硝態(tài)氮是植物最主要的氮源。植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量反映了土壤中硝態(tài)氮的供應(yīng)情況,可作為土壤氮肥的指標。

植物硝態(tài)氮/硝酸鹽含量試劑盒,微板法

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本試劑盒僅供科研使用 1 植物硝態(tài)氮試劑盒說明書 (貨號:WS9040W 微板法 96 樣) 一、產(chǎn)品簡介: 硝態(tài)氮是植物最主要的氮源。植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量反映了土壤中硝態(tài)氮的供應(yīng)情況,可 作為土壤氮肥的指標。測定植物體內(nèi)的硝態(tài)氮含量,不僅能夠反映出植物的氮素營養(yǎng)情況, 而且對鑒定蔬菜和以植物為原料的加工制品的品質(zhì)也有重要的意義。 在濃酸條件下,NO3-與水楊酸反應(yīng),生成硝基水楊酸,硝基水楊酸在強堿條件下呈黃色, 該黃色物質(zhì)在 410nm 處有光吸收,通過比色測定進而計算得植物硝態(tài)氮含量二、試劑盒的組成和配制: 注】:粉劑量在 mg 級別,使用前用手甩幾次或者進行離心,打開直接加入要求的試劑即可。 三、所需的儀器和用品: 酶標儀、96 孔板、天平、常溫離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、濃硫酸四、植物硝態(tài)氮含量測定: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗 樣本和試劑浪費! 1、樣本制備: ① 組織樣本: 稱取約 0.1g,加入 1mL 蒸餾水,室溫勻漿后,置于沸水浴中浸提 30min(期間不斷晃 動),待冷卻后于 25℃,12000rpm 離心 15min,取上清待測。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)15~10 的比例進行提取 ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌/細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取 500 萬細菌或細胞加入 1mL 蒸餾水; 超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次), 置于沸水浴中浸提 30min(期間不斷晃動),待冷卻后于 25℃,12000rpm 離心 15min取上清待測。 []:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為 500~10001 的比例提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 2、上機檢測1 酶標儀預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長至 410nm② 在 EP 管中依次加入: 試劑名稱(μL測定管 空白管(僅做一次) 樣本 10 蒸餾水 10 試劑一 40 40 室溫(25)反應(yīng) 10min 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 粉劑×4 4℃保存 用前甩幾下或 4℃離心使試劑落入試管底部,每 支再加 1.3mL 濃硫酸充分溶解,4℃避光保存 1 周。 試劑二 液體100mL×14℃保存 標準品 自備 若重新做標曲,則用到該試劑。本試劑盒僅供科研使用 2 試劑二 (沿著管壁務(wù)必緩慢加入) 950 950 混勻,取 200μL 96 孔板中,410nm 處讀取吸光值 AA=A 測定管-A 空白管。 【注】試劑一和試劑二含有強酸強堿物質(zhì),需做好實驗防護措施,謹慎操作! 五、結(jié)果計算: 1、標準曲線方程:y = 0.4165x + 0.003x 為標準品濃度(μg),y 為吸光值A。 2、按樣本質(zhì)量計算: 硝態(tài)氮(NO3 -N) 含量 (μg/g 鮮重)=[(A-0.003)÷ 0.4165]÷(W×V1÷V) =240.1×(A-0.003)÷W 3、按細胞數(shù)量計算: 硝態(tài)氮(NO3 -N) 含量 (μg/104 cell)=[(A-0.003)÷ 0.4165]÷(500×V1÷V) =0.48×(A-0.003) 4、按照液體體積計算: 硝態(tài)氮(NO3 -N) 含量 (μg/mL)=[(A-0.003)÷ 0.4165]÷V1=240.1×(A-0.003) V---加入提取液體積,1mLV1---樣本的加樣體積,10μL =0.01mL500---細胞數(shù)量,百萬; W---樣本質(zhì)量,g附:標準曲線制作過程: 1 制備標準品母液(500μg/mL):稱量 3.61mg 的硝酸鉀入 EP 管中,再加 1mL 蒸餾水 充分溶解(母液需在兩天內(nèi)用且-20℃保存)。 2 把母液稀釋成六個濃度梯度的標準品:0, 40, 80, 120, 160, 200. μg/mL。也可根據(jù)實 際樣本來調(diào)整標準品濃度。 3 依據(jù)測定管的加樣順序操作,根據(jù)結(jié)果即可制作標準曲線。



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