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土壤漆酶(S-Lac)活性檢測試劑盒
土壤漆酶(S-Lac)活性檢測試劑盒
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更新時(shí)間:2024-05-23 15:00:32瀏覽次數(shù):299

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【簡單介紹】
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土壤漆酶(S-Lac)活性檢測試劑盒
土壤漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,具有較強(qiáng)的氧化還原能力。

土壤漆酶(S-Lac)活性檢測試劑盒

土壤漆酶(S-Lac)活性檢測試劑盒

本試劑盒僅供科研使用 1 土壤漆酶(Soil LaccaseSL)試劑盒說明書 (貨號(hào):WS5230F 分光法 24 樣) 一、產(chǎn)品簡介: 土壤漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,具有較強(qiáng)的 氧化還原能力。土壤漆酶分解底物 ABTS 產(chǎn)生 ABTS 自由基,在 420nm 處的吸光系數(shù)遠(yuǎn) 大于底物 ABTS,測定 ABTS 自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。 二、試劑盒組分與配制 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 40mL×1 4℃保存 試劑二 粉劑×1 4℃保存 臨用前甩幾下,使粉劑落到底部, 再加 8mL 蒸餾水充分溶解,4保存一周,若變色則不能使用。 三、所需的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、可調(diào)式移液器、天平、低溫離心機(jī)、 振蕩培養(yǎng)箱。 四、土壤漆酶活性測定: 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)! 1、樣本制備 取新鮮土樣風(fēng)干或者 37 度烘箱風(fēng)干,先粗研磨,過 40 目篩備用。 2、上機(jī)檢測: ① 可見分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長到 420nm,蒸餾水調(diào)零。 ② 在 EP 管中依次加入: A 差值較小,可增加樣本量或延長反應(yīng)時(shí)間 T,則改變后的樣本質(zhì)量 W 和反應(yīng)時(shí)間 T 則代入計(jì)算公式重新計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算: 酶活定義:每克土壤每分鐘氧化 1nmol 底物 ABTS 所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。 SL 活性(nmol/min /g 土樣)=[A÷(ε×d)×V×109]÷W÷T=2.5×A÷W ε---ABTS 摩爾消光系數(shù):36×103L/mol/cmd---比色皿光徑,1cmV---反應(yīng)總體積,0.9mL=9×10-4LW---樣本質(zhì)量,gT---反應(yīng)時(shí)間,10min 試劑名稱(μL測定管 對(duì)照管 樣本(g0.06 0.06 試劑一 600 900 試劑二 300 37℃振蕩反應(yīng) 10min12000rpm4℃離心 5min,分別取上 清液轉(zhuǎn)移至 1mL 玻璃比色皿中,于 420nm 處讀取吸光值 AA=A 測定-A 對(duì)照(每個(gè)樣本做一個(gè)自身對(duì)照)。



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