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上海宇淳生物科技有限公司

主營產品: PCR八聯排管,sigma現貨,Cy7試劑

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044活性氧檢測試劑盒
活性氧檢測試劑盒
參考價 325
訂貨量 1
具體成交價以合同協議為準
  • 型號 044
  • 品牌
  • 廠商性質 經銷商
  • 所在地 上海市

更新時間:2019-05-16 10:30:19瀏覽次數:990

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【簡單介紹】
活性氧檢測試劑盒
本試劑盒提供了活性氧陽性對照試劑Rosup,以便于活性氧的檢測。Rosup是一種混合物,濃度為50mg/mL。
本試劑盒本底低,靈敏度高,線性范圍寬,使用方便。
本試劑盒可以測定100~500個樣品。

活性氧檢測試劑盒

活性氧檢測試劑盒

100~500次¥325

使用說明:

1. 裝載探針

對于刺激時間較短(通常為2小時以內)的細胞,先裝載探針,后用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞。對于細胞刺激時間較長(通常為6小時以上)的細胞,先用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞,后裝載探針。

原位裝載探針:本方法僅適用于貼壁培養細胞。按照1∶1000用無血清培養液稀釋DCFH-DA,使終濃度為10μmol/L。去除細胞培養液,加入適當體積稀釋好的DCFH-DA。加入的體積以能充分蓋住細胞為宜,通常對于六孔板的一個孔加入稀釋好的DCFH-DA不少于1mL。37℃細胞培養箱內孵育20分鐘。用無血清細胞培養液洗滌細胞三次,以充分去除未進入細胞內的DCFH-DA。通常活性氧陽性對照在刺激細胞20~30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。

收集細胞后裝載探針:按照1∶1000用無血清培養液稀釋DCFH-DA,使終濃度為10μmol/L。細胞收集后懸浮于稀釋好的DCFH-DA中,細胞濃度為一百萬至二千萬/mL,37℃細胞培養箱內孵育20分鐘。每隔3~5分鐘顛倒混勻一下,使探針和細胞充分接觸。用無血清細胞培養液洗滌細胞三次,以充分去除未進入細胞內的DCFH-DA。直接用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞,或把細胞等分成若干份后刺激細胞。通常活性氧陽性對照在刺激細胞20~30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。

說明:僅在陽性對照孔中加入Rosup作為陽性對照,其余孔不必加入Rosup。

2. 檢測

對于原位裝載探針的樣品可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察,或收集細胞后用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測。對于收集細胞后裝載探針的樣品可以用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測,也可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察。

3. 參數設置

使用488nm激發波長,525nm發射波長,實時或逐時間點檢測刺激前后熒光的強弱。DCF的熒光光譜和FITC非常相似,可以用FITC的參數設置檢測DCF。

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