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原代細胞分離與培養原代細胞是來源于胚胎、組織器官及外周血樣本經特殊實驗方法處理而制備的原初培養細胞,這一過程被稱為原代細胞分離
原代細胞是來源于胚胎、組織器官及外周血樣本經特殊實驗方法處理而制備的原初培養細胞,這一過程被稱為原代細胞分離。原代細胞具有保持原有細胞的基本性質,如果是正常細胞,仍然保留二倍體數。
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細胞的分離純化和細胞培養技術是細胞生物學實驗的基礎,通常把代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞。原代細胞培養是指將組織從動物體內取出,經各種酶(常用)、螯合劑(常用EDTA) 或機械方法剪碎處理,分散成單細胞,在合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖的過程。
原代細胞分離和培養項目 | ||
大鼠骨髓間充質干細胞原代培養 | 小鼠海馬神經元細胞原代分離培養 | 細胞傳代培養 |
大鼠膝關節軟骨細胞的原代培養 | 心肌成纖維細胞(CFs)原代培養 | 內皮細胞培養 |
大鼠脂肪間充質干細胞原代培養 | 骨髓內皮組細胞原代培養 | 胃上皮細胞培養 |
脂肪/骨髓/牙源間充質干細胞 | 小鼠海馬/大鼠脊髓神經元細胞 | 神經元細胞培養 |
人眼眶/大鼠心肌成纖維細胞 | 乳鼠心肌細胞培養操作 | 滑膜細胞原代培養 |
牛視網膜/小鼠腦微血管內皮細胞 | 大白兔/大鼠膝關節軟骨細胞 | 小鼠巨噬、小膠質/大鼠肝細胞 |
原代細胞分離與培養方法
懸浮細胞的分離方法:組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據需要收獲目的細胞。
實體組織材料的分離方法:對于實體組織材料,由于細胞間結合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
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