影響細胞轉(zhuǎn)染的因素,你知道嗎?
血清：血清影響復合物的形成，降低轉(zhuǎn)染效率
陽離子脂質(zhì)體和 DNA 的量在使用血清時會有所不同，因此想在轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基中加入血清時要進行條件優(yōu)化。大部分細胞可以在無血清培養(yǎng)基中幾個小時內(nèi)保持健康，對于對血清缺乏比較敏感的細胞，可以使用 OPTI-MEM I 培養(yǎng)基。對于對血清缺乏比較敏感的貼壁細胞，建議使用 LIPOFECTAMINE 2000。
抗生素：
比如*和*，是影響轉(zhuǎn)染的培養(yǎng)基添加物。這些抗生素一般對于真核細胞無毒，但陽離子脂質(zhì)體試劑增加了細胞的通透性，使抗生素可以進入細胞。這降低了細胞的活性，導致轉(zhuǎn)染效率低。
細胞代數(shù)：
轉(zhuǎn)染前細胞經(jīng)過 1-2 次傳代保證細胞生長旺盛容易轉(zhuǎn)染，注意貼壁細胞一旦長滿就不好轉(zhuǎn)染。
細胞鋪板密度：
一般轉(zhuǎn)染時，貼壁細胞密度為 70%-90%，懸浮細胞密度為 2*10^6--4*10^6 細胞/ml 時效果較好。確保轉(zhuǎn)染時細胞沒有長滿或處于靜止期。鋪板細胞數(shù)目的增加可以增加轉(zhuǎn)染活性和細胞產(chǎn)量。
DNA質(zhì)量：
DNA 質(zhì)量對轉(zhuǎn)染效率影響非常大。一般的轉(zhuǎn)染技術(shù)基于電荷吸引原理，如果 DNA 不純，如帶少量的鹽離子，蛋白，代謝物污染都會顯著影響轉(zhuǎn)染復合物的有效形成和轉(zhuǎn)染的進行。
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